ESS - DM -Técnicas Laboratoriais em Biopatologia
Permanent URI for this collection
Browse
Recent Submissions
- Técnicas de dissecção macroscópica de duodenopancreatectomias cefálicas: uma revisão da literaturaPublication . Rodrigues, Sara Alexandra Mendes; Silva, Regina Augusta Alves Pereira daA duodenopancreatectomia cefálica (DPC), conhecida também como “Whipple’s procedure”, é utilizada essencialmente para tratar tumores da cabeça do pâncreas e tumores ampulares. Pode também ser usada no tratamento de carcinomas do ducto biliar comum e do duodeno. O exame macroscópico das DPCs é uma etapa fundamental para o diagnóstico, avaliação das margens e para o estadiamento. Neste trabalho, será analisada a aplicabilidade das duas técnicas padronizadas mais usadas para análise macroscópica das DPCs: a técnica axial e a técnica de bivalve, com as neoplasias mais comumente encontradas. Para a seleção da técnica macroscópica a usar num dado caso, é necessário conhecer as vantagens e limitações de cada técnica. Está descrito que ambas as técnicas facilitam a disseção de gânglios linfáticos, no entanto alguns autores defendem que a técnica axial será a melhor por permitir, ainda, uma correta avaliação de todas as margens cirúrgicas. Outros especialistas relatam que atécnica de bivalve é preferencial para avaliações de carcinomas ductais, císticos ou amputares e a axial para carcinomas pancreáticos. A seleção da técnica de disseção macroscópica deve ser efetuada pelo técnico macroscopista ou patologista com base na sua experiência, informação imagiológica e estadiamento clínico do paciente. A literatura existente sobre técnicas de disseção das peças de DPCs não é suficiente para se conseguir extrair informação necessária para averiguar a técnica mais adequada para uma dada patologia, assim como para propor um novo protocolo de disseção baseado nas duas técnicas. Estas limitações são devidas em parte ao baixo número de peças de DPCs.
- Retinopatias hereditárias e sequenciação do ORF15 do gene RPGRPublication . Takács, Petra; Lopes, Alexandra Filipa Branco; Rocha, Hugo; Silva, Regina A.Retinopatias hereditárias têm uma prevalência de 1:1380 indivíduos, sendo que a retinite pigmentosa é a mais comum, com mais de 50 genes envolvidos. A formai mais severa é a ligada ao X, que corresponde a 5-15% dos casos de retinite pigmentosa e o gene RPGR está associado a 70-80% destes casos. O ORF15 é uma região altamente repetitiva no gene RPGR, de baixa complexidade e rica em purinas que excede 1kb de tamanho, tornando-o dofícil de sequenciar, seja por Sanger ou NGS. Dada esta dificuldade, o objetivo deste projeto foi desenhar novos primers para sequenciar esta região utilizando NGS multiplex, por meio de enriquecimento baseado em amplicões (amplicon based enrichment) e definição de PCR específicos. Foi ainda realizada uma compilação dos testes previamente executados pelo laboratório de retinopatias, para realizar uma análise descritiva e selecionar casos potencialmente relacionados com ORF15 do gene RPGR, para serem alvos de sequenciação. O laboratório consegui sequenciar esta região com sucesso, obtendo uma cobertura média de 1196 leituras, permitindo assim, implementá-la no laboratório e oferecer uma testagem mais ampla aos clientes, contribuindo para melhorar as capacidades diagnósticas para estas doenças.
- Técnica de dissecção ganglionar em amostras cirúrgicas de cancro colorretal: revisão da literaturaPublication . Alexandre, Cátia Vinagre; Silva, Regina Augusta Alves Pereira da; Conceição, Andreia CuradoA identificação de metástases ganglionares em peças cirúrgicas de cancro colorretal (CCR) é crucial para o sistema de estadiamento TNM, tendo valor prognóstico. Apesar de ser recomendado isolar um número mínimo de 12 gânglios linfáticos (GL) durante o exame macroscópico, tal nem sempre é conseguido. O presente trabalho teve como objetivo avaliar os métodos de disseção ganglionar descritos na literatura, para identificar o mais eficaz no isolamento de GL em peças cirúrgicas de CCR e o seu impacto no estadiamento. Dos 41 artigos analisados foram identificados dois métodos para otimização da disseção ganglionar. O primeiro baseia-se na utilização de soluções reveladoras de GL que contribuem para o isolamento de GL de menores dimensões, dado que alguns estudos mostram que um maior número de GL pode aumentar a precisão do estadiamento e contribuir para uma decisão terapêutica mais adequada. O segundo método foca-se na disseção ganglionar seletiva de acordo com a distância dos GL à região tumoral, pois o número de GL metastizados tende a diminuir com o aumento da distância ao tumor, podendo não haver vantagem na análise total não dirigida dos GL. Embora os resultados destes métodos sejam promissores, são necessário mais estudos multicêntricos para a sua validação.
- Avaliação de artefactos de fixação do cristalino em olhos fetaisPublication . Teixeira, Carolina Chaves; Silva, Regina Augusta Alves Pereira da; Braga, Ana CostaO estudo de autópsias fetais inclui a avaliação ocular, nomeadamente do cristalino. A constituição do cristalino condiciona à extensão dos efeitos de retração induzidos pela fixação e consequente formação de artefactos, que mimetizam as cataratas congénitas. O objetivo deste projeto é avaliar o impacto de protocolos de fixação na indução de artefactos histológicos do cristalino em olhos provenientes de autópsias fetais. Foram testadas duas soluções fixadoras (formaldeído a 4% e uma solução de formaldeído a 1% com glutaraldeído a 1,25%) e dois métodos de fixação (imersão convencional e imersão com incisões na esclerótica) nos 32 olhos de autópsias de interrupções médicas da gravidez. A observação histológica do cristalino (coloração de hematoxilina-eosina) revelou glóbulos em 83,3% dos casos (40% na solução em estudo e 16% com incisão), vacúolos em 100% (47% na solução em estudo e 20% com incisão), fendas em 100% (47% na solução em estudo e 20% com incisão), material proteináceo em 10% (formaldeído a 4%) e ausência de fragmentação capsular em 13% dos casos com incisão. A comparação dos quatro grupos não revelou diferenças estatisticamente significativas para os parâmetros avaliados. Esses resultados destacam a necessidade de realizar mais estudos para otimizar os protocolos de fixação de olhos fetais.
- Deteção de cancro da próstata por inteligência artificial em Histopatologia: uma revisão bibliográficaPublication . Pinho, Bia Alexandra Gonçalves de; Malhão, Fernanda; Silva, Regina; Vale, JoãoO cancro da próstata (CP) é o segundo tipo de cancro mais incidente nos homens. A implementação da patologia digital e a aplicação de algoritmos de inteligência artificial (IA) em CP estão em grande desenvolvimento. Esta revisão bibliográfica teve como objetivos expor as potencialidades e comparar algoritmos de IA para diagnóstico de CP, para facilitar a sua seleção e aplicação em laboratórios de Anatomia Patológica e, paralelamente, explorar algoritmos com aplicações em investigação. Foram selecionados seis softwares de IA para diagnóstico, com características distintas, como os tipos de deteção, tipo de amostra, percentagens de sensibilidade e especificidade e aprovação por entidades de conformidade. Concluiu-se que todos os softwares têm alta sensibilidade e especificidade, detetam o grau e realizam a quantificação tumoral, a grande maioria deteta o score de Gleason, porém, apenas o Paige Prostate Suite e o GalenTM Prostate avaliam a invasão perineural. No entanto, o DeepDx® Prostate é o único que permite avaliar cortes histológicos de prostatectomias radicais. Em investigação, verificaram-se maiores variabilidades de sensibilidade e especificidade, contudo, a sua referenciação é essencial uma vez que podem ter uma contribuição importante no desenvolvimento de novos algoritmos que podem ser aplicados na clínica.
- Análise de variantes no gene STK11 e sua influência na resposta à imunoterapiaPublication . Bessa, Ana Filipa Moreira; Cirnes, Luís; Silva, Regina Augusta Alves Pereira daA imunoterapia é uma ferramenta terapêutica de sucesso usadas no tratamento do cancro de pulmão, contudo alguns doentes não respondem à imunoterapia, apresentando progressão da doença ou morte. Uma das possíveis explicações para o insucesso da imunoterapia são alterações no gene Serine/ threonine Kinase 11 (STK11), que podem conferir resistência à terapia, uma vez que este tem grande influência no sistema imunológico. O objetivo deste projeto é estudar alterações genéticas no STK11 em pacientes com cancro de pulmão sujeitos a imunoterapia e a sua possível associação com a resposta do doente à terapêutica. Foram selecionados 38 doentes, procedeu-se à extração do ácido desoxirribonucleico (DNA), seguindo-se a realização da reação em cadeia da polimerase (PCR) para amplificação do STK11, o qual foi sequenciado para pesquisa de alterações genéticas. Foram detetadas e classificadas como patogénicas ou provavelmente patogénicas 14 alterações no STK11, não tendo sido identificado um codão ou exão com mais propensão a alterações. Pacientes com alterações no STK11 apresentaram pior sobrevida global e pior sobrevida livre de progressão de doença. Estes resultados sugerem que o STK11 deve ser estudado na sua totalidade aquando da decisão terapêutica e que deve ser incluído em painéis de Sequenciação de Nova Geração (NGS).
- Concordância mutacional em casos de cancro colorrectal síncronosPublication . Semião, Solange Santos; Oliveira, Rui Caetano; Granja, Sara da CostaO cancro colorretal (CCR) é a terceira causa de morte relacionada com o cancro, representando o terceiro tumor mais prevalente em todo o mundo. A identificação de mutações genéticas, nomeadamente mutações RAS e BRAF, são usadas como marcadores preditivos de resposta à terapia em doentes com CCR. Existem casos de CCR, que poderão apresentar dois ou mais tumores no mesmo paciente, denominados de tumores síncronos. Neste tipo de tumores podemos ter ou não concordância nas mutações. O conhecimento destas, pode ser bastante importante para a escolha adequada da terapêutica dirigida a administrar. A literatura atual não é conclusiva sobre a existência de concordância mutacional em tumores CCR síncronos, logo o objetivo deste estudo consistiu em avaliar a concordância mutacional em casos de CCR síncronos, especificamente a incidência de mutações KRAS, NRAS e BRAF. Este estudo foi efetuado com sistema Biocartis Idylla™, utilizando tecidos fixados em formaldeído e impregnados em parafina, de um total de 30 amostras provenientes de 14 pacientes com CCR síncronos. Com a realização deste estudo, verificou-se que 35,7% dos tumores síncronos não exibam concordância mutacional relativamente aos genes RAS e BRAF. Estes resultados poderão ter grandes implicações prognósticas, no entanto serão necessários estudos mais alargados.
- Evaluation of RRAS2 and ACD promotor mutations in thyroid tumoursPublication . Leite, Rúben Filipe Peixoto; Ferreira, Ana Paula Soares Dias; Silva, Regina Augusta Alves Pereira da; Vinagre, João Pedro Rico de OliveiraThyroid cancer is the most frequente endocrine neoplasm, being the tenth most prevalente in both genders and presents na overall good prognosis. Ras related 2 (RRas2), also known as TC21, is a GTP-binding protein that together with RRas1 and RRas3, is parto f the RRas GTPase subfamily. Mutations in RRas2 gene in the long-tailed hotspot Q72L/H block the hydrolysis of guanosine trophosphate (GTP) in Ras superfamily proteins, generating constitutively active proteins that will preferentially bound to GTP. In mice models, the insertion of the mutation RRas2 Q72L/H is associated to the ocurrence of thyroid tumours. This gen is composed by five exons encoding a member of the Ras superfamily that participates in the RAS-MAPK pathway. The ACD gene, also known as TPP1, encodes the telomere-binding protein TPP1 which recruits telomerase to telomeres. When adressing the promoter of this gene, we refer to it as the TPP1 promoter (TPP1p). TPP1 protein plays a key role in the telomere stability and lenght regulation. Mutations in its promoter were reported to create novel transcription factor binding sites as previously presented for telomerase promoter (TERTp). Co-expression of these two genes lead to telomere elongation, indicating that mutations in the TPP1 and TERTp can cooperate for the immortalisation of cancer cells. Our project aimed to evaluate mutations in the Q72L hotspot of the RRAS2 gene and in the TPP1p in thyroid tumours. Following genotyping of RRas2, we conclude that the presence of mutations in the Q72L hotspot may not represente a frequente oncogenic event, as we did not detect them. For TPP1p, although already presented in the literature, these alterations were not detected in our series, suggesting that they may be a rare event in thyroid tumours.
- Cistectomias; cistoprostatectomias e exenterações pélvicas: aplicação de um protocolo de macroscopia otimizadoPublication . Calisto, Rita Rodrigues; Vieira, Ana Filipa QuintelaA dissecção macroscópica é crucial para a obtenção de um diagnóstico preciso. É imperativo oferecer orientação e recomendações práticas para o sucesso desta prática. Durante o estágio realizado no Hospital do Divino Espírito Santo de Ponta Delgada, no âmbito do mestrado de Técnicas Laboratoriais em Biopatologia, observou-se a ausência de um procedimento protocolado para a realização da dissecção macroscópica de peças de cistectomias, cistoprostatectomias e exenterações pélvicas. Para dar resposta a esta problemática, foi realizada a aplicação de um protocolo de macroscopia otimizado e a elaboração de um modelo de relatório sinóptico macroscópico, para as peças em estudo. Em termos metodológicos, foi realizada uma pesquisa bibliográfica, que permitiu a redação do modelo de relatório sinóptico macroscópico e possibilitou o acesso a seis protocolos de dissecação macroscópica para as peças em estudo. Os protocolos foram analisados, avaliados e correlacionados, de modo a selecionar, entre os diferentes protocolos, a melhor prática para cada passo da dissecação e, consequentemente, obter um protocolo otimizado. Este estudo exploratório respondeu às necessidades da instituição, tendo contribuído para a estandardização e simplificação do procedimento de dissecação. Adicionalmente, permitiu a orientação e preparação do Técnico de Anatomia Patológica na dissecação macroscópica das peças em estudo, que garantirá uma melhor qualidade do diagnóstico.
- Vias moleculares comuns ligadas às doenças pulmonares intersticiais com fenótipo fibrosante progressivo: o papel da variante promotora MUC5BPublication . Gonçalves, Melany Patrícia Furtado; Santos, Ana Rita Faria dos; Silva, Regina Augusta Alves Pereira daAs doenças pulmonares intersticiais com fenótipo fibrosante progressivo (DPIs-FP) compreendem um grupo heterogéneo de doenças pulmonares associadas a alta morbilidade e mortalidade. Entre os DPIs-FP estão a fibrose pulmonar idiopática (FPI) e a pneumonite de hipersensibilidade (PH) fibrótica, a genética do hospedeiro e diferentes gatilhos ambientais desencadeiam uma resposta imunológica não controlada que pode culminar numa fibrose autossustentada. O polimorfismo de nucleótido único rs35705950 do gene MUC5B é a variante genética comum associada a maior risco de desenvolvimento de FPI. Neste trabalho caracterizamos o papel desta variante no desenvolvimento das DPIs-FP, nomeadamente, da PH fibrótica e, como grupo comparador, da FPI. Observamos que na nossa coorte a frequência do alelo menor está drasticamente aumentada em pacientes com FPI e PH fibrótica. Adicionalmente, a expressão da proteína MUC5B está aumentada no parâmetro pulmonar. Surpreendentemente, nos casos de PH fibrótica este aumento parece ser ainda mais acentuado nos indivíduos portadores do alelo menor, associando, também, a um aumento da frequência de macrófagos no lavado broncoalveolar. A nossa extensa coorte de doentes permite-nos aprofundar a caracterização destas patologias de forma a descodificar vias fibroproliferativas comuns e potenciais scores de risco que nos ajudem a, precocemente, identificar um paciente com capacidade de progressão.
- «
- 1 (current)
- 2
- 3
- »