ESS - DM - Análises Clínicas e Saúde Pública
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Percorrer ESS - DM - Análises Clínicas e Saúde Pública por orientador "Amorim, Maria Manuela"
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- Agentes etiológicos de infeções urinárias em ambulatório e suscetibilidade aos antibióticosPublication . Branco, Ana Isabel Ferreira; Amorim, Maria ManuelaAs infeções do trato urinário (ITU) são das infeções mais frequentes na comunidade, sendo a "Escherichia Colie", o principal agente etiológico. Em todo o Mundo ocorrem cerca de 150 milões de episódios ITU, sendo responsáveis por 15% dos antibióticos prescritos em ambulatório. Com o objetivo de caracterizar os agentes etiológicos das infeções urinárias e o seu perfil de resistência os antibióticos foi realizado um estudo descritivo transversal, sendo obtidos resultados de exames bacteriológicos de urina positivos de um laboratório privado de Análises Clínicas de prestação de serviços à comunidade, durante o período de Janeiro de 2014 a Dezembro de 2017. Registaram-se 59273 exames bacteriológicos de urina positivos. Escherichia coli foi o microrganismo mais isolado (65,1%), seguida de Klebsiella pneumoniae (13,2%), Proteus mirabilis (5,0%) Enterococcus spp (3,0%), Pseudomonas aeruginosa (2,5%) , Staphylococcus saprophyticus (1,5%) e Morganella morganii (1,2%). Verificou-se, no geral, um aumento da resistência dos agentes etiológicos de ITU aos antibióticos. A Klebsiella pneumoniae apresentou o maior aumento da resistência à Nitrofurantoína. A Morganella morganii foi a bactéria que apresentou resistência ao maior número de antibióticos. O baixo nível de resistência à Fosfomicina e Neutrofurantoína permite que estes antibióticos se apresentem como a opção terapêutica de primeira linha no tratamento empírico de ITU em ambulatório, pelo que estes resultados permitem corroborar com as orientações da Norma de 2011 da direção-Geral de Saúde.
- Aloimunização tardia nos doentes transfundidos na Região Autónoma da MadeiraPublication . Lobo, Ana Sofia Rodrigues; Amorim, Maria ManuelaA transfusão dos eritrócitos é a base para o tratamento de doentes com hematopoiese comprometida e para doentes com perdas significativas de sangue. Após a transfusão de eritrócitos, existe contacto com antigénios, nomeadamente, estruturas de polissacarídeos e proteínas, que podem ser diferentes do recetor, originando um reconhecimento por parte do sistema imunológico. Neste contexto, o organismo do recetor, ao não reconhecer como próprios estes antigénios eritrocitários, desencadeia o processo de anticorpos, designado por aloimunização. Objetivos: O presente estudo tem como principal objetivo detetar a incidência acumulada de doentes aloimunizados por transfusão na Região Autónoma da Madeira (RAM). Compreende ainda descrever a frequência dos anticorpos responsáveis pela aloimunização bem como caracterizar a população alvo em relação a idade, sexo, grupo sanguíneo, patologias associadas e história transfusional prévia. Metodologia: Realizou-se um estudo descritivo transversal aos registos clínico-laboratoriais de doentes aloimunizados, entre Janeiro de 2016 e Dezembro de 2019, no Serviço de Sangue e Medicina Tranfusional do Hospital Doutor Nélio de Mendonça, na Região Autónoma da Madeira (RAM). Foram excluídos doentes cujo resultado do teste de antiglobulina indireta (TAI) foi positivo na primeira determinação na RAM, doentes com anemia hemolítica e autoimune e imunizações por gravidez. Resultados: A incidência acumulada de doentes aloimunizados foi de 1,05%, sendo o anticorpo mais frequente o anti- K (15,9%). a população em estudo é mais frequente do sexo feminino (59%), com uma média de idades de 69 (+-13,63) anos. O grupo de sangue ARhD positivo é o mais frequente, seguindo-se o ORhD positivo. A patologia hemato oncológica é a que apresenta uma maior frequência nos doentes aloimunizados, com uma média 6,66 (+-6,79) transfusões de concentrados de eritrócitos por doente. A nível global o número médio de transfusões após o qual ocorre aloimunização é de 6,91 (+-7,55). Conclusões: O presente estudo demonstrou que a aloimunização tardia na RAM apresenta uma incidência de acordo com o esperado. Contudo, tornou possível evidenciar que na realização dos testes pré-transfusionais, a seleção do concentrado de eritrócitos a compatibilizar deve de ser sempre baseada no sistema ABO e RH mas também nos diversos sistemas de grupos sanguíneos com significado clínico.
- Anticorpos HLA não específicos ao dador: contributo no desempenho do rim transplantado com dador vivoPublication . Oliveira, Sara Carina Ferreira; Amorim, Maria ManuelaO estágio realizou-se na área da Transplantação do IPST-Porto, onde foram efetuadas metodologias automatizadas e avançadas de genotipagem HLA e de pesquisa e identificação de anticorpos HLA enquadrados no âmbito do transplante renal. Teve como objetivo adquirir conhecimentos e competências nestas metodologias. Este estágio teve ainda como objetivo desenvolver competências de investigação tendo sido realizado um estudo de caso sobre o tema da influência dos anticorpos anti-HLA não específicos ao dador no transplante renal com dador vivo. Como evidenciado na literatura, a presença de anticorpos específicos contra o dador tem impacto prejudicial na sobrevida do enxerto renal. Realizou-se um estudo analítico retrospetivo, numa amostra subdividida em duas subpopulações de recetores renais sem anticorpos HLA, verificando-se que a idade média dos recetores foi 48 ± 11,7 e 73,4% dos recetores foram predominantemente do sexo masculino; e com anticorpos anti-HLA verificando-se que a idade média dos recetores foi 50 ± 13,6 e 38,2% de recetores do sexo feminino foram transplantados com 65,5% de gestações. O número reduzido de casuística relativamente à população estudada, não permitiu obter uma análise de resultados com significância estatística. No entanto, parece indicar não haver relação significativa entre a presença de anticorpos anti-HLA não específicos ao dador e a evolução do transplante.
- Avaliação do rendimento dos reagentes nos coagulómetros ACL TOP® 550/750 e PFA-200 da ULS Santo AntónioPublication . Fonseca, Carmélia Sofia Amaral; Pereira, Mónica; Amorim, Maria Manuela; Ferreira, Stephanie LopesA gestão laboratorial envolve a utilização eficiente de recursos, pessoal e equipamentos, assegurando qualidade e conformidade legal, e permite adotar práticas de planeamento, manutenção e controlo que minimizam desperdícios e gastos desnecessários. O estudo realizado na Unidade Local de Saúde de Santo António teve como propósito avaliar a rendimento dos reagentes nos coagulómetros ACL TOP® 550/750 e PFA-200® e, consequentemente identificar as principais causas de desperdício dos reagentes. A análise incidiu sobre testes de rotina, como o Tempo de Protrombina, Tempo de Tromboplastina Parcial Ativada, D-Dímeros, Fibrinogénio e Anticoagulante Lúpico. Na análise dos resultados permitiu concluir que o rendimento dos equipamentos ACL TOP® 550, ACL TOP® 750 e PFA-200® é globalmente satisfatório, com percentagens de desperdício relativamente baixas. No ACL TOP® 750, o reagente de D-Dímeros destacou-se pela baixa estabilidade e maior desperdício, apontando para a necessidade de otimização da sua utilização. Este estudo permitiu ainda constatar uma diferença expressiva entre o número de testes estimado pelo fabricante e o número de resultados efetivamente obtidos Conclui-se que a gestão eficiente dos reagentes e a monitorização contínua do desempenho dos equipamentos são fundamentais para reduzir perdas, garantir sustentabilidade e assegurar a fiabilidade diagnóstica.
- Composição do microbioma intestinal em pessoas com VIH: Impacto da terapêutica antirretroviral e imunossupressãoPublication . Ribeiro, Patrícia Margarida Melo; Amorim, Maria Manuela; Ferreira, Stephanie LopesA infeção pelo vírus da imunodeficiência humana (VIH) compromete profundamente o sistema imunitário e permanece um importante desafio de saúde pública global. Apesar dos avanços terapêuticos com a introdução da terapêutica antirretroviral (TAR), persistem complicações como a inflamação crónica e a recuperação imunológica incompleta. Neste contexto, o microbioma intestinal tem emergido como um elemento central na compreensão da patogénese da infeção por VIH e das suas complicações. A presente dissertação teve como objetivo avaliar a relação entre a imunossupressão, a TAR e alterações na composição do microbioma intestinal em pessoas com VIH. Foi realizada revisão sistemática da literatura seguindo o protocolo PRISMA, com pesquisa nas bases de dados PubMed, Web of Science e Scopus, incluindo artigos publicados entre 2020 e 2024. Foram incluídos 39 artigos elegíveis, os resultados evidenciaram que a imunossupressão, especialmente com contagens de CD4+inferior a 200 células/ µL, está associada a disbiose intestinal, com menor diversidade microbiana, depleção de géneros benéficos com Faecalibacterium e aumento de géneros pós-inflamatórios como Escherichia/Shigella. A TAR demonstrou efeitos variáveis sobre o microbioma, com recuperação parcial da composição e função, mais eficaz em esquemas com inibidores da protéase do que com inibidores da integrasse. A disbiose associou-se ainda a biomarcadores inflamatórios (ex.: sCD74, LBP) e alterações metabólicas, com impacto no metabolismo do triptofano e produção de ácido gordos de cadeia curta. Estes resultados reforçam a importância do microbioma intestinal como alvo potencial de intervenções terapêuticas para melhorar o prognóstico e a reconstituição imune em indivíduos com VIH.
- Desenvolvimento e implementação de técnicas para deteção de alergénios nos alimentosPublication . Santos, Andreia Sofia Rego dos; Amorim, Maria Manuela; Gomes, António Augusto Araújo; Rocha, Hugo Daniel Carvalho de AzevedoAs reações de hipersensibilidade ou alérgica aos alimentos tem vindo a aumentar, e sendo a mostarda preta e os crustáceos uns dos principais alergénios responsáveis por estas reações de hipersensibilidade pelo que é impreterível a deteção e quantificação destes alergénios nas mais variáveis matrizes de alimentos. O estágio realizado em um Laboratório de Saúde Pública teve como objetivo adquirir conhecimentos e competências nas metodologias referentes à implementação de métodos para deteção de alergénios. O principal objetivo deste estudo foi implementar um método de deteção de alergénios da mostarda preta e de crustáceos em amostras de alimentos com diferentes graus de processamento. A extração de ADN foi realizada com recurso a um kit comercial da Qiagen. Por sua vez, a deteção dos alergénios foi feita através da tecnologia TaqMan, utilizando a técnica de qPCR. Foram utilizados, respetivamente, primers e sondas especificas para a mostarda preta e os crustáceos. Os resultados obtidos sugerem que este método permite detetar e quantificar a mostarda preta e os crustáceos, mesmo em matrizes mais complexas. Podemos afirmar que é um método sensível, dado que conseguimos detetar com 100% de eficácia uma quantidade reduzida de ADN do alergénio (˂20,8pg de ADN de mostarda preta e ˂25pg de ADN de crustáceos). Dado que a indústria alimentar não para de evoluir e matrizes mais complexas surgem no mercado, tem sido desafiante a deteção e quantificação de alergénios. Assim, os resultados obtidos neste estudo podem contribuir para uma melhor determinação dos alergénios e, consequentemente, garantir a segurança do consumidor.
- Estudo epidemiológico das infeções por Enterovírus D68 na ULS São JoãoPublication . Paula, Bárbara Sofia Pinto Costa; Rebelo, Sandra Paula da Costa Pinto da Silva; Amorim, Maria Manuela; Mota, Sandra Marlene da SilvaO Enterovírus D68 (EV-D68) tem emergido como agente de relevância em saúde pública devido à sua associação a infeções respiratórias graves e complicações neurológicas, nomeadamente a mielite flácida aguda (AFM). Este estudo analisou a circulação do EV-D68 na ULS São João entre agosto de 2022 e abril de 2025, através da avaliação epidemiológica, clínica e molecular de doentes submetidos a pesquisa de vírus respiratórios. Foram processados 8 964 pedidos de pesquisa de Enterovírus, dos quais 8 385 corresponderam a resultados válidos. Destes, 1 599 (19,07%) foram positivos. A maioria dos casos ocorreu em idade pediátrica, sobretudo em crianças menores de 5 anos, com ligeiro predomínio do sexo masculino. O padrão sazonal observado foi compatível com a circulação descrita para Enterovírus, concentrando-se no final do verão e outono. Contudo, picos em períodos atípicos poderão refletir a deteção de Rinovírus ou surtos de outros Enterovírus. Foram selecionadas 42 amostras de líquido cefalorraquidiano (LCR) para sequenciação genómica, mas não foi identificada nenhuma linhagem de EV-D68, mesmo em anos com surtos descritos internacionalmente. As limitações metodológicas, incluindo o tipo de amostra e a exclusão de coinfeções, podem ter condicionado estes resultados. Os dados reforçam a necessidade de estratégias laboratoriais mais direcionadas, com inclusão de amostras respiratórias, e da sensibilização clínica para o EV-D68, visando uma vigilância mais robusta e precoce deste agente em Portugal.
- Estudo laboratorial de componentes plasmáticos caninos: análise de parâmetros de coagulaçãoPublication . Barbosa, Paula Marisa Sousa; Amorim, Maria Manuela; Ferreira, Stéphanie LopesA crescente relevância da transfusão sanguínea na prática veterinária tem impulsionado o desenvolvimento e a otimização de metodologias laboratoriais voltadas para a produção de componentes específicos do sangue, como o crioprecipitado (CP) e o criosobrenadante (CS). Neste contexto, o presente trabalho teve como objetivo principal avaliar a eficácia de um protocolo ajustado para o processamento de crioprecipitados caninos, com base na análise de parâmetros hemostáticos em três tipos de frações plasmáticas: plasma fresco congelado, CP e CS. Foram analisadas 90 amostras obtidas de 30 cães dadores clinicamente saudáveis, recolhidas e processadas entre outubro de 2024 e fevereiro de 2025. A investigação centrou-se na quantificação dos fatores de coagulação I, V, VII, VIII e IX, assim como na determinação dos tempos de protrombina (TP) e tromboplastina parcial ativada (aPTT). A análise estatística foi conduzida com recurso a testes t de Student ou de Wilcoxon, conforme a distribuição dos dados, tendo sido considerado um nível de significância de 0,05. Os dados revelaram uma concentração significativamente mais elevada de fibrinogénio no CP (p<0,001), indicando uma recuperação eficiente deste fator. No entanto, observou-se também valores elevados dos fatores V, VII e IX neste mesmo componente, o que contraria o que é tradicionalmente descrito na literatura científica. Já o fator VIII não apresentou variações estatisticamente relevantes entre os diferentes componentes analisados. Estes resultados sugerem possíveis limitações no protocolo implementado, nomeadamente associadas ao descongelamento do plasma à temperatura ambiente, à ausência de uma etapa de centrifugação subsequente e a utilização de reagentes concebidos para matriz humana, cuja adequação a amostras de origem canina poderá ser questionável. Concluímos que os dados obtidos indicam que o protocolo testado não permite uma separação eficaz e seletiva dos fatores de coagulação desejados, comprometendo a qualidade funcional do CP produzido. Assim, torna-se imprescindível ajustar os procedimentos técnicos às normas reconhecidas para a produção de componentes plasmáticos de uso veterinário, nomeadamente assegurando o controlo preciso da temperatura, a realização de centrifugação adequada e a utilização de reagentes validados para a espécie animal em questão.
- Implementação e validação da técnica PCR em tempo real na identificação de organismos geneticamente modificados em alimentosPublication . Queirós, Cláudia Soares; Amorim, Maria Manuela; Gomes, António Augusto Araújo; Rocha, Hugo Daniel Azevedo CarvalhoA Engenharia Genética foi um dos maiores avanços tecnológicos, possibilitou a transferência de genes desejáveis entre organismos originando o aparecimento de Organismos Geneticamente Modificados (OGMs) e consequentemente o cultivo de plantas transgénicas. Ao longo do tempo, o número de OGMs comercializados/cultivados tem aumentado e tem surgido várias preocupações relativamente à sua segurança. Ainda hoje, o uso de OGM é objeto de debate entre a comunidade geral. À vista disso, a UE criou um quadro legislativo referente à presença de OGM, obrigando à rotulagem e rastreabilidade de cada género alimentício, o que permite oferecer uma informação completa ao consumidor. Para garantir a conformidade com as normas aprovadas, recorre-se a metodologias adequadas para a deteção e quantificação de OGM. Os métodos baseados no ADN, especificamente o PCR em tempo real são os de eleição para a deteção e quantificação de OGM. O estágio foi realizado num Laboratório de Saúde Pública, especificamente, num Laboratório de Biologia Molecular e teve como principais objetivos integrar conhecimentos e adquirir diversas competências na metodologia para a deteção de OGM. O objetivo do caso de estudo foi a implementação e validação da técnica de PCR em tempo real na identificação de OGMs em alimentos. A deteção e quantificação dos marcadores P-35s e T-nos por PCR em tempo real em amostras de Soja e Milho em diferentes estados físicos foi efetuada. Trata-se de um método sensível, dado que foi possível detetar com um nível de confiança de 95% uma quantidade de ADN dos marcadores inferior a 15,2 pg/reação. Além disso, o marcador P-fmv foi detetado com um nível de confiança de 95 % uma quantidade de 5 cópias/reação. O equilíbrio entre a segurança alimentar e a qualidade alimentar tem de estar presente em todos os passos da cadeia alimentar de forma a garantir a segurança do Homem, animal e do meio ambiente.
- As infeções associadas aos cuidados de saúde no Hospital Dr. Francisco Zagalo: uma abordagem microbiológicaPublication . Pinto, Raquel Marques Ferreira; Amorim, Maria Manuela; Ferreira, Stephanie LopesAs infeções associadas aos cuidados de saúde (IACS) e o indissociável aumento da resistência aos antimicrobianos são verdadeiros problemas de saúde pública mundial. O seu impacto ao nível da morbilidade, mortalidade e do consumo de recursos hospitalares é indiscutível, sendo de enorme importância a implementação de medidas de prevenção e controlo. Este estudo teve como objetivo caracterizar as IACS nos serviços com internamento do Hospital Dr. Francisco Zagalo. Um melhor conhecimento da realidade destas infeções permite complementar dados do Grupo Coordenador Local do Programa de Prevenção e Controlo de Infeções e de Resistência aos Antimicrobianos. Os resultados evidenciam maior frequência de infeções do trato urinário e dos agentes etiológicos Escherichia coli e Klebsiella pneumoniae, verificando-se neste último um maior perfil de resistência. Conclui-se que algumas das frequências de IACS e agentes etiológicos, assim como dos perfis de resistência estão concordantes com a literatura, evidenciando que estas problemáticas se enquadram numa realidade atual, com áreas a mudar e melhorar relativamente à prevenção e controlo. Assim, sugere-se estabelecer novas metas que permitam avaliar e ajustar medidas no sentido de reforçar planos futuros para esta problemática, bem como a elaboração de instrumentos que permitam aferir os resultados das metas propostas.