ESS - ACSP - Posters apresentados em eventos científicos
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- Ivermectin decreases the expression of ALDH1 in ovarian cancer cell lines in combination with chemotherapyPublication . Santos, Cláudia; Oliveira, Érica; Ally, Sofia; Nunes, Mariana; Resende, Albina; Ricardo, SaraCell Microarray (CMA) technology has been established as an essential tool for advancing cancer studies, allowing for the simultaneous protein analysis of multiple samples [1]. This method facilitates the exploration of various biomarkers associated with diagnosis, prognosis, and therapeutic response, making evaluation processes more efficient and comprehensive [1]. Carboplatin and paclitaxel are commonly used chemotherapy drugs for ovarian cancer treatment. Numerous studies have demonstrated that patients often develop resistance, underscoring the need to discover more effective therapeutic options to improve patient outcomes [2]. In oncology, drug repurposing has shown promising results in achieving this goal. Ivermectin, an antiparasitic drug, has been shown to enhance the efficacy of carboplatin and create a synergistic effect when combined with paclitaxel [3]. Aldehyde Dehydrogenase 1 (ALDH1) is an aldehyde catalyzer that plays a crucial role in drug metabolism. The study of this biomarker could be vital to the understanding of treatment resistance found in advanced ovarian cancer. Using the CMA approach, the aim is to explore the ALDH1 expression pattern in two ovarian cancer cell lines, after in vitro treatment with carboplatin, paclitaxel and ivermectin. Two ovarian cancer cell lines were used: OVCAR8, characterized by resistance to Carboplatin, and OVCAR8 PTX R C, which exhibits resistance to both Carboplatin and Paclitaxel [2]. The cells were exposed to chemotherapeutic agents for 48 hours, administered either alone or in combination with Ivermectin. After the incubation period, the cells were collected, formalin-fixed and embedded in Histogel®. Then the samples were paraffin-embedded and cut into glass slides to perform ALDH1 protein detection using immunocytochemistry. In general, ALDH1 expression was found in the cytoplasm of the cells with a dot pattern. Our results show that in both OVCAR8 and OVCAR8 PTX R C cell lines, the treatment with the combinations of carboplatin/paclitaxel plus Ivermectin, whether in 2D or 3D environments, leads to a notable decrease in ALDH1 expression compared to treatments in monotherapy. High levels of ALDH1 are associated with chemoresistance. The low levels of ALDH1 found in ovarian cancer cells treated with Ivermectin plus carboplatin or paclitaxel reveal a more sensitive profile, which could be a promising alternative for ovarian cancer treatment.
- Diagnostic pitfalls in Staphylococcus spp. surveillance: lessons from a multinational university student cohortPublication . Pinheiro, Bárbara; Gomes-Sampaio, Luís M.; Pacheco, Patrícia; Campos, Carla; Braz, Maria Pranto; Coelho, Cristina; Miranda, Carla; Quinteira, Sandra; Freitas, Ana R.; Campos, CarlaStaphylococcus aureus is a leading cause of severe and hard-to-treat human infections, particularly when resistant to cefoxitin due to the presence of the mecA gene [1]. However, diagnostic challenges arise from the misidentification of S. aureus and related species when relying on classical identification methods (mannitol fermentation;coagulase production), as well as from the detection of strains carrying the mecA gene but phenotypically susceptible to cefoxitin -known as "stealth" strains [2]. Building upon a previous collection of S. aureus from healthy students’ nares [3], we aimed to expand this collection with new samples, assess the occurrence of “stealth” isolates, and further investigate cases of incongruent identification. Nasal swab samples (n=557) from 507 students (median-23-years; 9 countries) attending alarge university (Porto district) were collected between March 2022 and November 2024. They were inoculated on to mannitol-salt agar and, in parallel, enriched in brain-heart-broth with 6.5%NaCl further plated on to ChromID® MRSA-SMART. Isolates deriving from mannitol-salt (only fermenting colonies) and chromogenic (all typical colonies) agar media were stored for species identification (MALDI-TOFMS), cefoxitin-susceptibility (disk-diffusion), and mecA gene screening (PCR). Staphylococcus aureus was identified in 46% (256/557; 6 countries) of cases. Other Staphylococcus species included S. haemolyticus(n=5), S. capitis(n=3), S. warneri(n=3), S. saprophyticus(n=1), S. simulans(n=1), and S. ureilyticus(n=1). These isolates expressed variable coagulase production (7 positive, 7 negative).On another hand, a non-fermenting S. aureus was detected (cromogenic medium).Ten (1.8%) students were colonized with methicillin-resistant staphylococci species carrying mecA including S. aureus (n=6), S. haemolyticus (n=3), S.ureilyticus (n=1). The mecA gene was also detected in 4/16 (25%; 3 Portuguese, 1 Italian) S. aureus susceptible to cefoxitin, the so-called “stealth”strains. Screening is ongoing in more isolates. Our study highlights the importance of integrating both phenotypic and genotypic methods for Staphylococcus accurate identification. Furthermore, the detection of stealth strains in healthy students underscores the need for robust community-based screening, as S. aureus carriage may be underestimated. Future studies will unveil whether these strains are capable of reversion to resistência.
- Peripheral metabolism in rat with olanzapine subchronic treatment supplemented with acetyl-L carnitinePublication . Amorim, Manuela; Silva, Ana Isabel; Alves, Cecília Juliana; Monteiro, Pedro R.; Magalhães, Ana; Summavielle, TeresaOlanzapine (Olz) have been reported to promote higher risk for metabolic side-effects, such as obesity, dyslipidemia, and diabetes. Moreover/On the other hand, acetyl-L-carnitine (ALC) has been reported to improve homeostasis. This study aims to explore if ALC could improve metabolic homeostasis due to Olz effects on a rodent model. We investigated the effects of subchronic administration of Olz and with the addition of ALC on body weight gain and glucose metabolism in Wistar rats. Mid-term Olz exposure in rats significantly increases blood glucose levels in fasting and after the overload of glucose compared to the sali-ne-treated group (p<0.05). However, in rats mid-term treated with olanzapine plus acetyl-L-carnitine had no significant differences in fasting blood glucose levels compared to the saline-treated group. The findings suggest that ALC added to Olz treatment appeared to be effective to improve glucose metabolism during olanzapine subchronic treatment.
- Decoding immunomodulatory interactions: Exploring the crosstalk between bone marrow-derived mesenchymal stem cells (BM-MSCs) out the bag and peripheral blood mononuclear cells (PBMCs) for potential in-vivo immunosuppressionPublication . Monteiro, Raquel L.; Lopes, Sérgio M.; Roncon, SusanaAllogeneic hematopoietic stem cell transplant is vital for haematological diseases, yet chronic complications arise as donor immune cells start attacking patient tissues. A lab barrier to studying this alloreactivity is the absence of the hematopoietic stem cell niche. Here, we employed BM-MSCs from discarded collection bags to solve this hurdle. The aim was to modulate PMBC proliferation in vitro, downregulating alloreactivity and proposing immunomodulation mechanisms. Responder PBMCs were labelled with CFSE dye, and stimulator cells irradiated. Co-cultured in a 2:1 ratio to mimic alloreactivity in MLR assays (n=3) for 6 days, with or without BM-MCs. MSC phenotype examined pre- and post-co-culture. Flow cytometry examined PBMC proliferation through CFSE histograms and assessed surface marker expression of CD45+, CD3+, CD4+, CD8+, CD19+, CD56+ and CD14+. Resazurin assays tracked metabolic activity. CFSE immunofluorescence recorded PBMC proliferation, while phase-contrast images showed PBMC-MSC physical interactions. Data is shown as mean ± standard deviation. Statistical significance assessed with Two-Way ANOVA test (p<0.05). BM-MSCs expanded successfully, maintaining ideal phenotype and function. CD44+ expression increased significantly in MSCs post-culture. CFSE expression aligned only with PBMC format, whilst phase-contrast images revealed closer alignment in co-culture. Metabolic activity showed enhanced metabolism in PBMCs/MSCs co-culture, with a 15% reduction in proliferating responder cells. March's pending immunophenotyping results will enhance understanding of the observed immunosuppression. Expanding BM-MSCs from discarded bags unravelled immunosuppression in alloreactive conditions. BM-MSCs, lacking CD44, had increased expression due to in-vitro cultivation. Reduced alloreactive PBMC proliferation by 15% highlights MSCs' immunosuppressive potential. Upcoming immunophenotyping insights will detail the immunosuppression seen.
- Ética e deontologia nas tecnologias da saúdePublication . Cruz, Agostinho; Lopes, Paula; Amorim, Manuela; Cabral, Ana Paula; Curado, Henrique; Faria, Isabel; Gonçalves, Maria João; Machado, Alberto; Sousa, Helena; Monteiro, Pedro; Tavares, DianaMuitas são as Instituições de Ensino Superior (IES) que ministram cursos na área da saúde e onde são desenvolvidos estudos de cariz clínico, sendo necessário garantir a salvaguarda dos padrões de (bio)ética, por forma a proteger e garantir a dignidade e integridade humana e a proteção/segurança dos seus dados pessoais. O Decreto-Lei n.º 80/2018 (15 /outubro), veio estabelecer princípios e regras aplicáveis ao funcionamento das comissões de ética integradas em IES, que realizem investigação clínica. A Comissão de Ética da Escola Superior de Saúde (CE da ESS) do Politécnico do Porto tem 10 anos de existência, desenvolvendo atividade de apoio aos projetos de investigação integrados em cursos de graduação e/ou dos seus Centros de Investigação, ou de entidades externas. Assim, para além da análise e emissão de pareceres relativos à investigação realizada, a CE da ESS tem intervém ainda no eixo da formação, objetivando padrões conduta (bio)ética, proteção e garantia da dignidade/integridade humana e proteção/segurança dos dados pessoais e/ou sensíveis, segundo os Códigos Deontológicos e de Conduta das Tecnologias da Saúde. Nestas áreas da saúde, os dilemas surgem no dia-a-dia dos profissionais e são devidos tanto às diferentes patologias, como aos procedimentos de diagnóstico e terapêutica utilizados. Existe ainda a problemática da confidencialidade e registo, que tem vindo a assumir cada vez maior importância, com o incremento da autonomia do paciente / utente. O respeito pelos direitos do utente, nas questões relativas ao controlo e acesso à informação clínica e terapêutica, pressupõe conhecimento e experiência do profissional quanto aos limites ético-deontológicos, dada a gestão constante do risco inerente à intervenção, tendo em vista o objetivo último da mesma: o bem-estar de quem procura estes profissionais.
- Tuberculose na atualidade: intervenção na comunidade para promoção da literacia em saúdePublication . Batista, Ana Beatriz; Ferreira, Daniela Filipa; Fonseca, Ana Faria; Mota, Sandra; Lamas, MC; Amorim, ManuelaA literacia em saúde baseia-se na capacidade dos cidadãos tomarem decisões acertadas em relação à sua saúde relacionando-se com o grau em que podem obter, processar e compreender informações e serviços de saúde, necessários para tomarem decisões de saúde adequadas. O baixo nível de literacia em saúde pode levar a menor consciência em adequar os seus comportamentos para melhorar a atitude face às doenças e à adesão aos cuidados. A tuberculose (TB) é uma doença de crescente preocupação na comunidade médica e um problema de saúde pública, devido à sua transmissão e difícil controlo. Sendo a Literacia em Saúde assume-se um ponto-chave para a inversão desta tendência, desenvolveu-se uma intervenção através da plataforma zoom, com recurso a metodologias ativas, para perceber o nível de conhecimento sobre a TB, fatores de risco associados e promover a educação individual e comunitária. Realizada no âmbito de Educação Clínica II, na área das Análises Clínicas e Saúde Pública, do curso de Ciências Biomédicas Laboratoriais da ESS|Porto, e teve como público-alvo alunos de 12º ano, com idades compreendidas entre 17-19 anos, do curso de Biotecnologia. A ação pretendeu elucidar camadas jovens para esta doença tão atual e capacitá-los, sensibilizando-os, para a importância da prevenção, diagnóstico precoce, resistências aos antibacilares e vacinação. A intervenção permitiu o diálogo e troca de ideias que se revelaram enriquecedoras. No final, foi disponibilizado um questionário. Dos 74,1% dos respondentes, a maioria considerou a ação e a temática muito pertinente e muito interessante (72,5% e 80%) e que a intervenção estava muito bem organizada (82,5%). O retorno de grupos de jovens ativos, evidencia muito a necessidade da continuidade deste tipo de intervenções, através de metodologias ativas e participativas. Acresce ainda a aquisição de conhecimentos e competências transversais que num contexto de ensinoaprendizagem mais clássico e menos dinâmico poder-se-ia não atingir.
- Enfarte agudo do miocárdioPublication . Gonçalves, Ana Patrícia; Pereira, Soraia; Gomes, Ana Patrícia; Lamas, MC; Mota, Sandra; Amorim, ManuelaAs cardiopatias isquémicas, nomeadamente, o enfarte agudo do miocárdio (EAM), representam uma das principais causas de mortalidade em Portugal. O EAM está associado a vários fatores de risco, dos quais alguns modificáveis e associados a estilos de vida saudável. Esta é uma das vertentes em que podemos intervir de modo a reverter esta tendência. Neste seguimento, no âmbito da unidade curricular de Educação Clínica II, na vertente das Análises Clínicas e Saúde Pública, do curso de Ciências Biomédicas Laboratoriais da ESS|Porto, realizou-se uma sessão de sensibilização em colaboração de uma Junta de Freguesia. Esta sessão teve como objetivo dar a conhecer a patologia e medidas de prevenção, contribuindo desta forma para reconhecer fatores de risco, necessidade de alteração de hábitos alimentares e de atividade física, biomarcadores a controlar e a disponibilidade de biossensores para melhor promover a saúde individual e respetiva responsabilização. Com recurso ao software PowerPoint a informação apresentada foi estruturada nos seguintes tópicos: mortalidade e morbilidade, fisiopatologia, sinais e sintomas, fatores de risco, como reconhecer e atuar e qualidade de vida após enfarte. Durante toda a sessão foi estimulado o diálogo com os participantes através de várias metodologias: MindMeter, utilização de cartões de cores distintas para avaliar e discutir conhecimentos, aplicação PollEv para que tivessem retorno sobre o conhecimento adquirido ou aprofundado na sessão. De forma a avaliar a sessão foi distribuído um questionário de satisfação. Os participantes consideraram o tema muito pertinente (78,0%) e gostaram da forma como os conteúdos foram abordados (78,0%). A temática que despertou maior interesse foi a descrição da patologia (78,6%) seguindo-se os sinais e sintomas (64,3%). Quer os participantes quer a Junta de Freguesia manifestaram interesse na continuidade deste tipo de intervenções que consideram fundamentais para a população desta zona ter consciência da sua responsabilidade na gestão da sua saúde.
- Efeito de uma sessão de exercício físico associao à transferência elétrica capacitiva resistivaPublication . Noites, Andreia; Vale, Ana Luísa Pinto; Pereira, Ana Sofia Teixeira; Morais, Andreia Sofia Silva; Amorim, Manuela; Moreira, Teresa; Vilarinho, RuiA acumulação de tecido adiposo na região abdominal é um fator de risco para o desenvolvimento de doenças cardiovasculares. No sentido de procurar estratégias que atuem sobre a adiposidade abdominal, a radiofrequência e o exercício físico surgem como aliados, permitindo elevar o metabolismo celular potenciando a lipólise. Verificar se uma sessão de Transferência Elétrica Capacitiva abdominal associada a uma sessão de exercício físico aeróbio moderado é mais eficaz ao nível da lipólise do que uma sessão de exercício físico isolado. Este estudo randomizado controlado duplamente cego, contou com a participação de 30 indivíduos saudáveis do sexo feminino, distribuídos aleatoriamente em dois grupos, um grupo experimental (n=15) e um grupo placebo (n= 15). Os participantes alocados ao grupo experimental foram sujeitos a uma sessão de Transferência Elétrica Capacitiva abdominal seguida de exercício físico aeróbio de intensidade moderada. O grupo placebo realizou o protocolo de RF com intensidade de zero watts, seguido do protocolo de exercício físico aeróbio semelhante ao do grupo experimental. Foram realizadas análises sanguíneas antes e após o protocolo de intervenção de forma a determinar alterações no perfil lipídico e na concentração de glicerol. O estudo foi aprovado pela comissão de ética da Escola Superior de Saúde- Politécnico do Porto (registo nº 1351/2018). Não foram observadas alterações significativas nas concentrações de glicerol entre os grupos (p>0,05), verificando-se, entre momentos, um aumento estatisticamente significativo desta variável nos dois grupos. Não foram detectadas alterações nas restantes componentes lipídicas entre grupos após intervenção e entre os dois momentos de avaliação (p>0,05). Não se verificou o aumento da lipólise quando se associou a Transferência Elétrica Capacitiva Resistiva ao exercício físico, sugerindo que o efeito desta técnica pode ocorrer por outros mecanismos.
- Mapping of key bacterial species for Postmorteminterval calculationPublication . Ferreira, Ana Cláudia; Barbosa, Daniel J.; Campos, Carla; Oliveira, Ricardo Jorge Dinis; Freitas, Ana R.Estimation of the PostmortemInterval (PMI), the time elapsed since death, is one of the most challenging issues in forensic sciences. Most studies focus on extensive bacterial sequencing, but culture-based experiments for higher taxonomic resolution remain scarce. We aimed to analyze total bacterial counts and map Enterococcus faecalis, Staphylococcus aureusand Escherichia coliin different organs and timepoints. Male C57BL/6J SPF mice underwent three independent assays during 11 postmortemtimepoints. Feces and organs (n=10: intestine/stomach/skeletical muscle/liver/spleen/kidney/bladder/lungs/ brain/heart) were collected and resuspended in buffered peptone water, then plated onto enriched nonselective and selective culture media (n=4). Following routine aerobic incubation, Colony Forming Units (CFU) per gram/tissue or per mL/sample were quantified for total/individual bacterial loads. Species were identified by MALDI-TOF MS and statistics were done in GraphPad-Prism v.10.0.1. Species (n=44) from 13 families and 3 phyla were identified, with notable consistency in the presence of Staphylococcus xylosus, E. faecalis, and E. coliacross all experiments. Particular families were consistently identified across all organs, including Enterococcaceae and Enterobacteriaceae mostly in the later stages of decomposition, and Bacillaceae resisting often until the last timepoint, whereas Staphylococcaceae was variably detected. The early and substantial contamination observed in skeletal muscle, stomach, and intestine, makes them unsuitable for PMI calculations. E. faecalisappeared promising as a potential biomarker for kidney, liver, and, possibly, brain invasion at later timepoints, whereas E. faecalisand E. coliin the bladder, and E. coliin the spleen and heart, warrant further investigation for similar biomarker potential. This is one of the first quantitative cultural studies assessing how time elapsing postmortem affects the growth/evolution of key bacterial species, with E. faecalisand E.coliemerging as promising traceable biomarkers in real postmortem contexts. While recognizing the limitations of not considering the complex microbiota network, our pilot study brings an easy species-specific approach and offers a baseline for future human-oriented investigations.
- Nasal colonization by Staphylococcus aureusin Health Sciences students and analysis of risk fac-tors under a One Health perspectivePublication . Gomes-Sampaio, L. M.; Cláudia-Ferreira, A.; Prata, J. C.; Azevedo, R. M. S.; Pacheco, P.; Campos, Carla; Novais, C.; Peixe, L.; Dinis-Oliveira, R. J.; Coelho, C.; Miranda, C.; Quinteira, S.; Freitas, A. R.Staphylococcus aureusis the leading bacterial cause of death globally. Nasal carriage of S. aureusincreases the risk of invasive infections, including by methicillin-resistant S. aureus(MRSA) strains, but studies including Portuguese university students (PUS) are scarce. To analyse the prevalence of methicillin-susceptible S. aureus(MSSA) and MRSA among PUS enrolled in different courses/years (1st-4th) at IUCS-CESPU, characterize their antibiotic resistance profiles, and assess the potential risk factors. Swabs collected during March-December 2022 from anterior nares of 156 volunteers (median 22-years) were processed in mannitol-salt agar and, in parallel, enriched in brain-heart broth with NaCl 6.5% further plated onto ChromID® MRSA SMART. Typical colonies were stored for species identification (MALDITOF-MS) and antibiotic susceptibility testing (disk diffusion; EU-CAST/CLSI guidelines). Each student completed a questionnaire comprising demographic/clinical/social parameters. Statistical analysis was conducted in IBM-SPSS Statistics 26 using binary logistic regression applying a backward stepwise (likelihood ratio) method, with α=0.05, selecting variables using Chi-square tests and Mann-Whitney U tests for which p≤0.20, >10 occurrences, not biologicallycorrelated. Prevalence of MSSA and MRSA (cefoxitin screening) were 28.8% and 1.9%, respectively. From the 45 positive samples, 9% were multidrug-resistant, 38% were resistant to penicillin, 40% to erythromycin, 40% to clindamycin (inducible),7% to cefoxitin, 2% to tetracycline, and 2% to rifampicin. Self-reported frequent contact with animals (OR=3.44, CI 95%: 1.10–10.66) were positively associated with S. aureus, while regular sports participation presented a negative association (OR=0.36, CI 95%: 0.17–0.77). Sports participation was not correlated with self-reported excellent health (χ2=0.680, p=0.409). This is one of the first studies assessing MSSA/MRSA rates in PUS after the COVID-19 pandemics imposing higher self-protection/hygienization. While PUS-MSSA rates are similar to that previously observed, PUS-MRSA rates are slightly higher. Additional samples are being processed to explore future trends and other potential One Health factors influencing MSSA/MRSA colonization.