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- Modulation of oxidative stress with a-tocopherol (vitamin E) in saccharomyces cerevisiaePublication . Gavina, Maria Adriana Alves; Vieira, Mónica; Prudêncio, CristinaNeurodegenerative diseases, such as Parkinson’s Disease or Alzheimer’s Disease, are characterized by the death of a subset of neurons over long periods of time. These agerelated diseases are becoming more prevalent with the generalized increase of life expectancy and have been linked by many authors with increased oxidative stress levels. Indeed, oxidative stress effects can be accounted as cumulative damage, which associates well with the delayed onset and progressive nature of these conditions. Moreover, various results on life extension research strongly support the hypothesis that enhancing the cell protective systems against oxidative stress can extend life span. In view of this, the present study aimed at evaluating the role of the antioxidant α-tocopherol (vitamin E) on induced oxidative stress conditions. α-tocopherol (vitamin E) was chosen for its principal role in scavenging lipid peroxyl radicals, at lipoproteins and cell membranes, hence breaking the chain of lipid peroxidation initiated by ROS. The toxic effect of hydrogen peroxide (H2O2) and the antioxidant role of vitamin E were investigated using Saccharomyces cerevisiae as a model for cell viability. A HighPerformance Liquid Chromatography analysis was also performed to assess 3nitrotyrosine and GSH:GSSG production levels, due to their relevance as oxidative stress biomarkers. Altogether, the results presented here demonstrated that H2O2 exposure decreased yeast cells viability equally, independent of dose, and that the adverse effects were, at least, partially rescued by the combined exposure with vitamin E. The results from redox biomarkers were, however, shown to be inconclusive. This preliminary study helped to understand the dual nature of vitamin E, under the conditions tested. However, future studies should be able to further explore vitamin E antioxidant role in pathological models of neurodegenerative diseases.
- Orientação postural do tronco na sequeência de sentado para de pé em indivíduos após acidente vascular-cerebralPublication . Coutinho, Joana Teodora Barbosa; Silva, Cláudia; Silva, AugustaIntrodução: A orientação postural inter-segmentar constitui um requisito fundamental, no âmbito do controlo postural (CP), para a eficiente realização das tarefas funcionais inerentes à participação do individuo no dia-a-dia, estando frequentemente comprometida após um acidente vascular cerebral (AVC). Objetivo(s): Caraterizar a orientação postural do tronco, durante a realização da tarefa funcional de sentado para de pé (SP), particularmente no momento de translação anterior, em indivíduos após AVC. Especificamente, pretendeu-se comparar, respetivamente, os hemitroncos ipsilesional (IPSI) e contralesional (CONTRA) destes indivíduos com os hemitroncos dominante (DOM) e não dominante (NDOM) de indivíduos saudáveis, no que se refere: (1) à orientação das escápulas (OE), (2) à flexão anterior do tronco (FAT), (3) à flexão lateral do tronco (FLT), (4) à inclinação lateral do tronco (ILT) e (5) à orientação da pélvis (OP). Métodos: Foram incluídos no estudo 20 indivíduos, divididos em dois grupos: (1) 10 indivíduos com alterações neuromotoras após AVC e (2) 10 indivíduos saudáveis. Ambos os grupos realizaram a tarefa funcional de SP e, recorrendo-se ao software de avaliação postural (SAPo), procedeu-se à análise das variáveis cinemáticas descritas anteriormente no momento de translação anterior do tronco. Foram assim comparados os dados dos hemitroncos IPSI e CONTRA do grupo após AVC com os dos hemitroncos DOM e NDOM do grupo de indivíduos saudáveis, respetivamente. Resultados: os indivíduos do grupo após AVC registaram maior componente de flexão anterior do tronco, maior distância entre a vértebra T3 e a EIPS no lado IPSI e da distância entre o ângulo inferior da escápula e a vértebra T7 no mesmo lado. Observou-se, também, uma tendência para a inclinação lateral para o lado IPSI. Estes resultados refletem uma diminuição do CP do tronco e diminuição da atividade dos estabilizadores da escápula mais evidente no lado IPSI. Os indivíduos após AVC evidenciaram também um menor ângulo entre o tronco e a coxa no lado IPSI e anteversão da pélvis, de forma a manterem a estabilidade durante a realização do movimento. Conclusão: Os resultados deste estudo sugerem que os indivíduos após AVC evidenciam uma menor capacidade na organização da orientação segmentar do hemitronco IPSI.
- Efeitos da indução miofascial do quadrado lombar na estabilidade postural em pé após acidente vascular cerebralPublication . Lemos, Luísa Cioato; Pinheiro, Ana Rita; Cunha, ChristineIntrodução: Após acidente vascular cerebral (AVC) é comum persistirem alterações sensoriomotoras que se refletem no comprometimento do controlo postural (CP), interferindo com a funcionalidade dos indivíduos. A redução da mobilidade e a presença de posturas assimétricas prolongadas após-AVC podem afetar as propriedades do sistema fascial, o qual possui um papel propriocetivo importante, potenciando assim a disfunção sensoriomotora, a qual influencia o esquema corporal que serve de base para o CP e movimento. Dessa forma, a indução miofascial surge como uma intervenção com o propósito de promover a sua remodelação e mobilidade. Objetivo: Avaliar os efeitos imediatos e após 24h da indução miofascial do quadrado lombar na estabilidade postural em pé em indivíduos após-AVC. Métodos: Foi desenvolvido um estudo randomizado controlado, duplamente cego, no qual participaram 10 indivíduos de ambos os sexos, em fase crónica após evento vascular único no território da artéria cerebral média, com tempo de evolução após AVC de 6-48 meses. Os participantes foram alocados em dois grupos: o grupo de indução miofascial do quadrado lombar (GIQL) e o grupo placebo (GP). Foi estudada a estabilidade postural pela análise de variáveis relacionadas com o deslocamentos do centro de pressão (CoP), obtidas através de uma plataforma de forças Bertec (FP4060-1000). Estatisticamente recorreuse ao teste de Mann-Whitney, para análises entre grupos, e ao teste de dois fatores de Friedman, para análises intra-grupo, com um nível de significância de 0,05. Resultados: Imediatamente após a aplicação do procedimento experimental, não foram observadas diferenças com significado estatístico em todas as variáveis analisadas. No entanto, após 24h da aplicação do procedimeneto no GIQL, observou-se um aumento estatisticamente significativo das variáveis amplitude média e velocidade média no sentido médio-lateral, assim como da área total e velocidade média. Não se observaram diferenças no GP. Conclusão: os resultados sugerem que o procedimento de indução miofascial do quadrado lombar parece promover alterações na estabilidade postural dos indivíduos após-AVC após 24h de aplicação do procedimento. Contudo, este achado carece de maior análise a fim de perceber se estas alterações são no sentido de otimizar o controlo postural.
- Estudo de biomarcadores da doença de Niemann-Pick tipo CPublication . Almeida, Filipe Jorge Sales; Ribeiro, Isaura; Quelhas, Dulce; Magalhães, Jacinto; Ferraz, RicardoA doença de Niemann-Pick tipo C (NPC) é uma patologia neurodegenerativa progressiva e transmissão autossómica recessiva. É classificada como uma doença rara apresentando uma prevalência estimada de 1 por cada 100000 nados vivos. A doença de NPC é caracterizada por uma acumulação de colesterol e vários esfingolípidos no cérebro e nos órgãos viscerais, devido à perda funcional das proteínas NPC1 e/ou NPC2 envolvidas no tráfego de colesterol. Esta acumulação de colesterol constitui o hallmark patognomónico da doença. A heterogeneidade clínica, associada a sinais e sintomas não específicos e que se sobrepõem com outras patologias, dificultam o diagnóstico, podendo levar a um longo atraso entre a apresentação dos sintomas iniciais e a confirmação laboratorial. Até muito recentemente, o diagnóstico bioquímico desta patologia era efetuado com recurso à coloração de filipina. Apesar de durante muito tempo ter sido considerado gold standard para o diagnóstico de NPC, este ensaio apresenta limitações: i) implica uma colheita invasiva, pois pressupõe a realização de uma biópsia de pele; ii) morosidade, implica o tempo de cultura da biópsia; iii) tecnicamente exigente; iv) é um método qualitativo e pouco específico. O diagnóstico é posteriormente confirmado pela identificação de variantes patogénicas nos genes NPC1 e NPC2. Recentemente, e baseado na acumulação de lípidos que ocorre nesta patologia, nomeadamente esteróis, esfingolípidos e lisoesfingolípidos, têm sido desenvolvidas novas abordagens de diagnóstico. Este trabalho teve como objetivo primário a implementação de um teste rápido, quantitativo, sensível e robusto que permitisse o estudo dos biomarcadores Lisoesfingomielina (LysoSM) e do seu análogo carboxilado, Lisoesfingomielina-509 (LysoSM-509), recorrendo ao método de cromatografia líquida acoplada à espectrometria de massa em tandem, LC-MS/MS. O estudo destes biomarcadores permitiu implementar um método complementar de diagnóstico para os doentes de NPC, além de permitir discriminá-los dos doentes com deficiência em Esfingomielinase Ácida (ASMD). Este método passou a ser utilizado como método de rastreio de primeira linha para estas duas patologias, ultrapassando essencialmente as limitações dos tradicionais testes de diagnóstico, reduzindo o tempo de intervenção do operador, além do custo e tempo de resposta.
- Dietary supplements with green tea marketed in Portugal: information on website, labels and antioxidant activityPublication . Castro, Joana Gomes Zenha; Pinho, Cláudia; Oliveira, Ana IsabelThe use of plants and their health benefits have been recognized over the years. Its use and consumption of herbal dietary supplements has increased in the last years in United States and Europe. Internet is one of the most required options to buy dietary supplements (DS). Several studies suggest that information on most sites is incomplete, poorly referenced, and may contain illegal claims. Thus, a conscious and informed decision is essential for consumers. Camellia s inensis , also known as green tea, is one of the most consumed plants worldwide and has been recognized by its antioxidant potential over the years. This activity can protect several diseases with an oxidative stress origin. For these reasons, a study was performed to evaluate the quality of information on websites selling dietary supplements with green tea. A modified DISCERN tool was used to evaluate websites from pharmacies/parapharmacies, websites from food health stores, and websites without physical space. Websites scored 1 or 2 at evaluation rating (Low – serious or extensive outcomes). These results reveal the importance of developing a checklist for the online marketing of herbal products, based on DISCERN instrument, or other. These instruments can guide health professionals, who have a very important role in directing patients to high-quality sources of information.Legal framework for dietary supplements varies among countries, and in Portugal, DS are regulated by the Direção Geral de Alimentação e Veterinária (DGAV). Although there are directives published by European Commission, in Portugal, decree-law are incomplete and DS safety is placed on the substance’s manufacturer or marketer. In addition, clinical trials are not required for DS in Portugal, which allows adulteration, falsification, contamination and incorrect labels. In Portugal, DS can be sold in pharmacies, parapharmacies, supermarkets, dietetic stores and online, and consumers should be able to make informed and appropriate health care choices. Also, consumers use DS labels (information provided on the packaging) and leaflets to further their understanding about some DS ingredients, relevant indication(s), directions for use, side effects, contraindications and drug-supplements interactions. For these reasons, another study was performed using an adapted form to evaluate legal and scientific information of twenty green tea DS sold in pharmacies, parapharmacies and health food stores in Portugal. From the legal and scientific points of view none of the websites fulfilled all the analyzed criteria. Seven DS (35.0%) had indications of use similar to those mentioned in the literature. Adverse reactions and drug interactions information were rarely provided by two and three DS, respectively. Green tea is a complex mixture of several constituents, which include phenolic compounds like catechins, flavonoids, and phenolic acids. This chemical composition is associated with antioxidant activity. Antioxidant products demand has been increasing over the last years. They are referenced as having a protective role in many diseases, like cancer, neurodegenerative and cardiovascular disorders. Considering the lack of legislation, in Portugal, that controls DS prior to its introduction in the market, the last aim of this thesis was to evaluate antioxidant activity of six green tea supplements (three isolated and three mixture of substances/plant extracts). This evaluation was performed by common assays, namely, DPPH, superoxide and Fe2+ chelating assays. Results showed that antioxidant activity depends on composition and concentration of each substance present in green tea’s DS. In addition, green tea DS studied showed different antioxidant results at different assays performed. These thesis results may contribute to understand the importance of quality information provided by websites selling DS, and also the importance of regulation regarding its manufacturing and selling.
- Influência do stifness e da co-ativação do antagonista na fase postural de diferentes tarefas funcionaisPublication . Marques, Luís Diogo Lopes; Sousa, Andreia; Silva, Augusta; Santos, RubimIntrodução: O facto de o Stiffness ativo ser um preditor de estabilidade articular, sendo modulado pelos níveis de co-ativação, pode ser um indicador da eficiência do SNC na geração de um “tónus postural” adequado. O estudo dos componentes do stiffness em condições passivas, insuficientes para a manutenção de estabilidade postural, justificou a sua avaliação de acordo com um modelo teórico, realizada na posição de pé, aproximando-se de um registo funcional. Objectivo(s): Analisou-se o nível de correlação entre as variáveis, stiffness funcional, co-ativação do antagonista a nível da tibiotársica e o deslocamento do COP, durante a execução de três tarefas funcionais. Métodos: Foram avaliados 21 participantes saudáveis, sem patologias ou fatores que afetem a performance motora. O stiffness funcional foi avaliado na posição de pé através da relação entre o momento de forças e o ângulo do tornozelo. A magnitude de co-ativação do antagonista dos pares TA_SOL, TA_GM e Ventral_Dorsal e o deslocamento do COP foram avaliados na posição de pé, fases posturais do início da marcha e transição para sentado, através da análise da EMG e dados provenientes de uma plataforma de forças. Utilizou-se a correlação de Spearman e Pearson para verificar o nível de correlação entre variáveis com nível de significância de 0,05. Resultados: Foram observadas correlações moderadas no sentido negativo entre a co-ativação do antagonista e o deslocamento do COP do MA no inicio da marcha (TA_SOL: r:-0,570,p:0,011; TA_GM: r:- 0,524,p:0,024; Ventrais_Dorsais: r:-0,533,p:0,019). Não foram observadas mais correlações entre os níveis de co-ativação, o deslocamento do COP na posição de pé e na fase postural do stand to sit, e os valores do Stiffness funcional. Conclusão: Os níveis de co-ativação do antagonista do MA correlacionam-se com o deslocamento do COP, na fase postural do início da marcha, não se correlacionando com a posição de pé, nem na sequência do stand to sit, assim como o stiffness funcional, podendo levar a crer que este não é o mecanismo de controlo postural escolhido pelo SNC nestas tarefas, nesta amostra.
- Influence of KRAS activation in the colorectal cancer immunosurveillance escapePublication . Machado, Ana Luísa Marinho da Cunha; Velho, Sérgia; Oliveira, Maria José; Vieira, MónicaThe imune system as a host defense system watches the cell growth and division, eliminating cells with antigens different from those present in healthy cells. However, some transformed cells have the capacity, through various mechanisms, to escape the immune system. Genomic instability and some mutations are pointed as possible mechanisms supporting the imune surveillance escape,asisthecaseofoncogenicmutations. KRAS mutation is presente in about 40% of cases of colorectal cancer and confers to the tumor a greater potential for malignancy. It is known that KRAS and BRAF mutant cancer cells regulate the recruitment, activation,and differentiation of imune cells,promoting tumor evolution by ensuring leakage to the immune system and increasing the proliferative potential. Few evidences highlight an association between a KRAS mutation and myeloid cells, mainly macrophages and neutrophils infiltration. However, the mechanism which determines this interaction remains unclear. To investigate how the KRAS and BRAF mutations can influence the immune response, either by regulating the expression of immunomodulatory molecules, leading to altered crosstalk between the tumor and the immune system, or by regulating immune cell infiltration. In our work, a series of immunomodulatory molecules were analyzed by flow cytom-etry in a panel of KRAS and BRAF mutant colorectal cancer cells in which KRAS/BRAF was silenced by small interfering RNA. Additionally, the influence of chemotherapy and IFN-Y administration, wich is a non-consensual possible therapy, in the expression of immune checkpoints molecules was also evaluated. It was also performed immunohistochemistry staining of F4/80 to access the in vivo infiltration and distribution of macrophages i the mouse colonic epithelium. Preliminary results suggest that KRAS silencing lead to the alternation of some molecules involved in the crosstalk with the immune system cells, such as macrophages and lymphocytes, as long as BRAF silencing did not cause any alternation. Additionally, in some cases, chemotherpy and IFN-y administrationshowed to have some influence on the upregulation of theses immune molecules expression, wich was impaired by KRAS silencing. On the other hand, KRAS mutation, was not capable to increase the macrophage infiltration in the mouse colon epithelium. KRAS activation seems to be capable of regulating the expression of surface markers, wich can regulate and suppress the immune response against cancer cells, and to influenc the macrophage infiltration whwn combined with another frequent mutation.
- Estudo de alterações moleculares induzidas por oxidantes e antioxidantes em modelo eurocariontePublication . Graça, Andreia Duarte Allen; Vieira, MónicaA disfunção mitocondrial e a agregação proteica são dois fenómenos que têm vindo a ser relacionados com as doenças neurodegenerativas e ambas estão interligadas com o stress oxidativo celular. A disfunção mitocondrial relaciona-se com o dano nos ácidos nucleicos e a agregação proteica com erros no folding proteico. No entanto, ainda não se definiu a agregação como uma causa ou consequência das doenças neurodegenerativas. Assim sendo, estadissertaçãodemestradotevecomoprincipaisobjetivosanalisarainfluênciadediferentes concentrações de peróxido de hidrogénio, um agente oxidante produzido pelas nossas células, na agregação proteica e no material genético, bem como o papel da vitamina E na reversão do efeito do H2O2. Para isso, amostras celulares de Saccharomyces cerevisiae foram recolhidas a meio da fase exponencial de crescimento. A análise dos agregados insolúveis foi realizada através da técnica eletroforética SDS-PAGE seguida de lise proteica e a quebra do DNA foi analisada através de eletroforese de agarose 1,5% seguida de RAPD-PCR. A exposição ao agente oxidante ao longo do tempo potenciou a agregação proteica, nomeadamente da ovalbumina. No entanto, o agente antioxidante não demonstrou qualquer tipo de reversão do efeito oxidante, parecendo apresentar um efeito pró-oxidante. Apesar de se observarem diferenças na agregação proteica ao longo do tempo, não se observaram quebras no material genético.
- Primary hearing health: action to raise awareness on secondary educationPublication . Tomé, David; Neto, Catarina; Santos, Tiago; Lopes, PaulaWith the evolution of technology, young people increasingly use portable devices for entertainment, learning and as a means of communication. Most of the use of these devices involves excessive and unnecessary exposure to noise and/or high intensity sounds, which can cause hearing loss. The aim of this work was to know the receptiveness on lecturing sessions to raise awareness of hearing health and risk behaviors in the eighth year of secondary education and what are the activities/exercises more appropriate for knowledge consolidation.
- Práticas educativas no 1º ciclo do ensino básico: avaliação do impacto de uma intervenção experimental sobre lavagem das mãosPublication . Lago, Carla do; Lamas, Maria CéuO ensino experimental das Ciências no 1.º Ciclo do Ensino Básico pode assumir-se como um elemento fundamental na aquisição de novos conhecimentos de forma dinâmica, integrativa e prazerosa. A parca informação científica nos manuais escolares de Estudo do Meio (adotado pelo Agrupamento), sobre os hábitos de higiene na lavagem das mãos, levou ao desenvolvimento de um projeto experimental sobre esta temática, promovendo a consciencialização dos alunos para a adoção desta prática de forma fundamentada e estruturada com recurso a atividades experimentais e a questões-problema.