Browsing by Author "Carvalho, Daniel"
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- Análise de resíduos de 5-fluorouracilo no exterior de bombas infusoras após realização de tratamento oncológico em ambiente domiciliárioPublication . Cardoso, Andreia; Barreiros, Luísa; Sá, Maria dos Anjos; Sousa, Eulália; Carvalho, Daniel; Correia, Patrícia; Moreira, FernandoPese embora os benefícios potenciais da administração infusional de 5-fluorouracilo (5-FU) em regime de domicílio, já existiram relatos de derrames e resíduos de 5-FU no exterior de bombas infusoras, que reforça a necessidade do desenvolvimento e aplicação de metodologia analítica que permita a sua deteção e quantificação (Chefchaouni et al., 2023).
- Aplicações nanotecnológicas tópicas com quercetinaPublication . Carvalho, Daniel; Pinho, Cláudia; Moreira, Fernando; Oliveira, Ana IsabelA quercetina, flavonoide com capacidade antioxidante, apresenta diversas atividades biológicas, relevantes no tratamento de afeções relacionadas com o stress oxidativo. Apesar de a sua aplicação se encontrar limitada, existem várias metodologias para contornar esta condicionante, como a nanotecnologia, que apresenta inúmeras vantagens. Analisar, na literatura, o progresso realizado, no desenvolvimento de nanopartículas carregadas com quercetina para aplicação cutânea. Foi realizada uma revisão clássica da literatura, utilizando isoladamente e em associação as palavras-chave “quercetin”, “nanotechnology” e “skin”, nas bases de dados PubMed e Science Direct, entre os anos de 2012 e 2022, em língua inglesa e portuguesa, tendo sido incluídos 13 artigos. Diversos nanossistemas têm sido utilizados na preparação de nanopartículas com quercetina, nomeadamente nanopartículas poliméricas e lipídicas, nanofibras e nanocristais. Em termos de caracterização, observa-se a obtenção de nanopartículas estáveis nos diversos estudos, com tamanhos entre 25,00 e 361,16 nm, potenciais zeta entre -80 e +37 mV e índices de polidispersibilidade entre 0,190 e 0,306. Várias atividades biológicas/aplicações terapêuticas foram também estudadas, como: diminuição do edema, cicatrização de feridas cutâneas e proteção celular contra o stress oxidativo. Estes resultados demonstraram os nanossistemas lipídicos estudados como potenciais alternativas quer para a aplicação tópica de quercetina, quer para o tratamento de feridas. Também as nanopartículas poliméricas demonstraram ser uma boa opção para a entrega tópica de quercetina, em particular para o tratamento de feridas, sendo que a sua funcionalização com ácido hialurónico demonstrou ser vantajosa. Além destes nanossistemas, as nanofibras, nanopartículas de óxido de titânio, nanocristais e glicerossomas demonstraram ser boas alternativas para aplicação cutânea de quercetina. Grande parte destes nanossistemas não demonstraram toxicidade para com linhas celulares cutâneas e demonstraram elevada penetrabilidade cutânea. Vários nanossistemas têm apresentando resultados promissores na utilização da quercetina, com maior direcionamento para o desenvolvimento de pensos e formulações para o tratamento de doenças cutâneas. Porém, mais estudos devem ser realizados para otimização de características e propriedades destes nanossistemas.
- Atividade antimicrobiana de espécies da flora africanaPublication . Santos, Daniela; Carvalho, Daniel; Cruz, Agostinho; Oliveira, Rita; Barreiros, Luisa; I Oliveira, Ana; Pinho, CláudiaAtualmente tem-se verificado um aumento do número de plantas usadas a nível medicinal, especialmente para o tratamento de infeções, face ao aparecimento de resistências a fármacos antimicrobianos. Estas infeções têm um grande impacto em África, e, como tal, as plantas surgem como uma alternativa, uma vez que a maior parte da população já as utiliza para a manutenção do seu estado de saúde. Compilar os estudos que avaliem a atividade antimicrobiana de plantas existentes em África. Efetuou-se uma pesquisa nas bases de dados PubMed e Science Direct, usando as palavras chave “Plantas Africanas”, “Atividade Antimicrobiana”, “Microdiluição”, “African Plants”, “Antimicrobial Activity” e “Microdilution”, tendo sido incluídos artigos publicados entre 2010-2020, em língua inglesa ou portuguesa e que analisassem a atividade antimicrobiana em bactérias e fungos usando o método da microdiluição.
- Avaliação da atividade antioxidante do extrato etanólico da Adansonia digitataPublication . Santos, Daniela; Carvalho, Daniel; Rente, Ana; Silva, Jorge; Caldevilla, Renato; Cardoso, Andreia; Oliveira, Ana Isabel; Pinho, CláudiaO Baobá (Adansonia digitata) é uma planta africana usada na medicina tradicional devido às suas propriedades antioxidantes, resultante da sua composição em compostos fenólicos, que desempenham um papel importante na prevenção de doenças associadas ao stress oxidativo. O principal objetivo deste trabalho é avaliar a atividade antioxidante do extrato etanólico de A. digitata. Estudo experimental com análise do extrato etanólico 70 % (V/V) de A. digitataproveniente do fruto seco, obtido comercialmente. A aferição da atividade antioxidante foi feita através de diferentes ensaios: radical (2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl (DPPH), poder redutor do ferro (FRAP) e quelação da ferrozina. No ensaio FRAP a maior percentagem de redução do ferro foi 2,75 %, obtida com a maior concentração testada (1000 μg/ml). Em relação ao ensaio da ferrozina, as percentagens de quelação do ferro variaram entre 19,88 ± 2,50 % e 27,08 ± 8,64 %, onde a percentagem mais elevada foi obtida com a concentração de 30 μg/ml. Os resultados foram inferiores aos do controlo positivo (EDTA), cujas percentagens de inibição rondaram os 100 %. No ensaio do DPPH, o extrato do baobá obteve um IC50 de 656,97 ± 12,45 μg/ml, valor muito acima do controlo positivo usado, a quercetina (IC50 = 1,8 μg/ml). Os estudos de avaliação da atividade antioxidante existentes na literatura com a planta têm sido realizados com diferentes solventes (ex: água, metanol, acetona) e partes da planta (ex: folhas, polpa do fruto). Num estudo de Irondi et al., (2016) o extrato metanólico, proveniente de folhas de baobá, demonstrou um valor de IC50 para o ensaio de DPPH de 230 ± 0,01 μg/ml. Por sua vez, num estudo de Ismail et al., (2019) os melhores valores de FRAP foram obtidos com 80% acetona (5141,19 ± 45,37 mg Trolox/100 g peso seco); os melhores valores de DPPH obtiveram-se com acetona acídica (acetona + água + HCl) (80:19:1; V/V/V) (2501,46 ± 50,61 mg Trolox/100 g peso seco) e com 80% acetona (2390,07 ± 49,15 mg Trolox/100 g peso seco). Alguns autores consideram que os extratos vegetais têm uma atividade antioxidante elevada ou significativa quando os ensaios apresentam valores de IC50 < 50 μg/ml; uma atividade moderada com valores de IC50 entre 50 e 100 μg/ml; e uma atividade antioxidante baixa com valores de IC50 > 100 μg/ml. Os resultados obtidos neste estudo demonstram que o extrato de baobá analisado parece ter uma baixa atividade antioxidante. Contudo, são necessários mais estudos com a planta, utilizando ensaios complementares e diferentes técnicas extrativas,no sentido de confirmar o potencial antioxidante do extrato etanólico de baobá.
- Avaliação in vitro da segurança do extrato etanólico da Adansonia digitata em células cutâneasPublication . Santos, Daniela; Carvalho, Daniel; Rente, Ana; Silva, Jorge; Caldevilla, Renato; Cardoso, Andreia; Oliveira, Ana Isabel; Pinho, CláudiaO baobá (Adonsonia digatata) é uma árvore nativa de África, pertencente à família Bombacaceae e ao género Adansonia. É utilizada na medicina tradicional africana para o tratamento de diversas doenças devido às suas atividades anti-inflamatórias, antioxidantes e antimicrobianas, tendo atraído o interesse da indústria farmacêutica. Com base na eficácia de diversos extratos de A. digitata, tem sido colocada a hipótese de que a planta poderá exibir também outras atividades biológicas, no entanto os dados relativos à sua toxicidade são ainda escassos. Desta forma, o trabalho tem como principal objetivo avaliar a segurança, in vitro, do extrato etanólico de A. digitata, numa linhagem de células da pele (HaCaT). Trata-se de um estudo experimental com análise do extrato etanólico a 70 %(V/V) de frutos de A. digitata. Para a determinação da segurança do extrato numa linhagem celular de queratinócitos humanos (HaCaT), recorreu-se ao ensaio do brometo de 3-(4,5-dimetiltiazol-2-il)-2,5-difeniltetrazólio (MTT). No ensaio MTT, o extrato de baobá testado em concentrações que variaram de 5 μg/ml a 1000 μg/ml, apresentou percentagens de viabilidade celular entre os 77,81 ± 0,5 % e 131,22 ± 9,6 %, sendo que nas concentrações inferiores a 500μg/ml, os valores de viabilidade obtidos foram superiores a 100 %. O valor mais alto encontrado foi na concentração de 5 μg/ml. Desta forma, o extrato parece ter um efeito não citotóxico nas células HaCaT, após 48 horas de incubação. De acordo com o National Cancer Institute, um extrato bruto é geralmente considerado como tendo atividade citotóxica in vitro se o IC50é < 20 μg/mL Partindo deste pressuposto, os resultados do extrato etanólico de baobá podem providenciar um suporte quanto à segurança do seu uso tradicional. Os estudos de citotoxicidade de extratos de baobá são escassos, no entanto, no seu estudo, Dzoyemet al., (2014) demonstraram que o extrato do fruto de baobá, preparado com acetona, apresentou um IC50de 204 ± 0,01 μg/ml contra células Vero, após 48 horas de incubação. O baobá em concentrações inferiores a 500 μg/ml parece ser seguro para a linhagem celular estudada. Contudo, mais estudos são necessários para se concluir sobre a sua atividade protetora em concentrações mais altas nesta e noutras linhagens celulares, assim como em extratos preparados com outros solventes e diferentes partes da planta.
- Chromatographic methods developed for the quantification of quercetin extracted from natural sources: systematic review of published studies from 2018 to 2022Publication . Carvalho, Daniel; Pinho, Cláudia; Oliveira, Rita; Moreira, Fernando; Oliveira, AnaQuercetin (QUE) is the most widely used flavonoid for therapeutic purposes. To improve the available knowledge about the properties of some natural products, determining the amount of QUE is crucial. The main objective of this systematic review is to identify the analytical methods validated for detecting and quantifying QUE in different matrices and characterize their sensitivity. A search was conducted until 30 June 2023 in the PubMed database for experimental studies that addressed the validation of chromatographic analytical methods to detect and quantify QUE from consumable natural products. Only studies published between 2018 and 2022, written in English, were included. The risk of bias was assessed by emphasizing methods of comparison according to previously published studies. Descriptive statistics were used to depict the obtained results. The studies were analyzed based on the type of QUE source, chromatographic method, and validation parameters. A total of 17 studies were included in this review. Plants were the most commonly analyzed source of QUE. Among the detection methods, spectrophotometry proved to be the most widely used, surpassing mass spectrometry (MS). After analyzing the bias, all the included studies mentioned/presented, totally or partially, at least four of the eight parameters
- Development and validation of an analytical method to assess the importance of using gauze dressings in luer-lock connection systems during the preparation of cytotoxic drugsPublication . Silva, Clara; Carmo, Helena; Oliveira, Vânia; Carvalho, Daniel; Moreira, Fernando; Moreira, FernandoHealthcare professionals face occupational hazardous when handling cytotoxic drugs used for cancer treatment. The International Society of Oncology Pharmacy Practice (ISOPP) standards are the guidelines recommended by the European Parliament for safety procedures but, unlike others (e.g. Occupational Safety and Health Administration (OSHA)), fail to mention the need to use dressings at luer-lock connections to contain cytotoxic leaks. This study aims to develop and validate an analytical method capable of identifying and quantifying cyclophosphamide (CP) and 5-fluorouracil (5-FU) in gauze dressings. Methods: Gauze dressings (20x10 cm) containing varying concentrations of CP and 5-FU were placed in 15 mL falcons containing acetonitrile:methanol:water (19:13:68). After stirring, the samples were passed through a 0.22 µm filter. The extracted samples were then analyzed using HPLC-DAD, equipped with a C18 column (Hypersil Gold ™ 150mm x 4.6mm and 5µm particle size). The mobile phases employed were acetonitrile:methanol:water (19:13:68) (CP) and 0.5% acetic acid in water (5-FU) and detection was set at 205 nm (CP) and 260 nm (5-FU). The mean of five calibration curves generated for each drug were calculated, each exhibiting R² > 0.997, thus confirming the linearity for both drugs. Regarding sensitivity, LOD of 0.006 µg/cm2 for 5-FU and 0.11 µg/cm2 for CP and LOQs of 0.02 µg/cm2 for 5-FU and 0.32 µg/cm2 for CP, were obtained. Accuracy fell within the range of 93%-110% and precision was set between 91% and 99%. At room temperature, gauze dressings deliberately contaminated exhibited superior stability for 5-FU compared to CP. The method has been successfully validated and, once suitability is confirmed, it will be applicable for the evaluation of the importance of using gauze dressing when handling cytotoxic drugs, by testing contaminations occurring during reallife routine handling of these cytotoxic drugs.
- Development and validation of an analytical method to quantify cytotoxic drugs in gauze dressings used in luer-lock connection systems for a safer preparationPublication . Silva, Clara; Carmo, Helena; Oliveira, Vânia; Carvalho, Daniel; Moreira, FernandoDespite patient ́s benefits, healthcare professionals face occupational hazardous when handling cytotoxic drugs used for cancer treatment. Several organizations outline procedures, conditions, and equipment recommended for safe handling. The International Society of Oncology Pharmacy Practice (ISOPP) standards are the guidelines recommended by the European Parliament but, unlike others (e.g. Occupational Safety and Health Administration (OSHA)), they omit the recommendation of using dressings at luer-lock connections to contain cytotoxic leaks. This study aims to develop and validate an analytical method for cyclophosphamide (CP) and 5-fluorouracil (5-FU) identification and quantification in gauze dressings for monitoring real-life occupational situations. Gauze dressings (20x10 cm) containing varying concentrations of CP and 5-FU were placed in 15 mL falcon tubes containing acetonitrile:methanol:water (19:13:68). After stirring, the samples were filtered through a 0.22 μm filter and analyzed using HPLC-DAD, equipped with a C18 column (Hypersil Gold ™150mm x 4.6mm and 5μm particle size). The mobile phases employed were acetonitrile:methanol:water (19:13:68) (CP) and 0.5% acetic acid in water(for 5-FU), with detection set at 205 nm (CP) and 260 nm (5-FU). The mean of five calibration curves was calculated for each drug, each exhibiting R² > 0.997, confirming the linearity for both drugs. Regarding sensitivity, LOD of 0.006 μg/cm2(5-FU) and 0.11 μg/cm2(CP) and LOQs of 0.02 μg/cm2(5-FU) and 0.32 μg/cm2(CP), were obtained. Accuracy ranged between 93%-110%, while precision ranged between 91%-99%. At room temperature, gauze dressings deliberately contaminated exhibited superior stability for 5-FU compared to CP. The method has been successfully validated for analyzing CP and 5-FU residues in gauze, meeting essential validation criteria. Upon suitability verification, the method will be applicable for the evaluation of the importance of using gauze dressing when handling cytotoxic drugs, by assessing contaminations occurring during their real-life handling routine.
- Development of quercetin-loaded polymeric nanoparticles for topical applicationPublication . Carvalho, Daniel; Pinho, Cláudia; Moreira, Fernando; Oliveira, Ana IsabelQuercetin, a phenolic compound, has been attracting a growing interest from the scientific community due to its health benefits (i.e. antioxidant, anti-inflammatory, and cardiovascular protection), and may become useful in the prevention and/or treatment of several diseases. Nevertheless, its pharmaceutical industry application is limited, due to its physicochemical characteristics, such as bioavailability. However, there are several methodologies to overcome this constraint, such as nanotechnology, which as numerous advantages. The main aim of this study was the development of quercetin-loaded polymeric nanoparticles for skin application. Quercetin-loaded polycaprolactone (PCL) nanoparticles formulation were prepared using the nanoprecipitation method. Several proportion of PCL: quercetin (PCL:QUE) were studied. Nanoparticles were characterized regarding size, polydispersity index, zeta potential, association efficiency, and loading capacity In vitro assays were conducted to evaluate the effect of nanoparticles on HaCaT cells. To evaluate the effectof nanoparticles in cell viability MTT assay were used. For nanoparticles protective effect, a pre-incubation regimen was applied to determine cell viability. Among all tested PCL: QUE rations, an average size of 240 nm, with a polydispersity index around 0.240, and a zeta potential of about -24 mV were obtained. The association efficiency was about 40%. The proportion with a PCL:QUE ratio of 1:0.07 showed the best combination of characteristics and, consequently, the highest stability, and was selected for further testing. Cell proliferation determined by MTT assay after 24 hours reveal that at high concentrations, PCL: QUE nanoparticles were more effective in terms of cell proliferation than free quercetin (100 μg/mL; p < 0.001). Regarding pre-incubation regimen the same relation was observed (100 μg/mL; p < 0.001). The produced nanoparticles showed a good characteristic correlation and appeared to be stable. A protective effect and cell proliferation induction on HaCaT cells were observed when compared the highest concentrations tested for nanoparticles with the isolated compound.
- Interacções medicamentosas potenciais entre antineoplásicos orais e analgésicos opioidesPublication . Antunes, Cláudia; Carvalho, Daniel; Jesus, ÂngeloO uso de antineoplásicos orais é cada vez mais importante, pelos múltiplos benefícios e pela introdução de novas moléculas com novos mecanismos de ação. A dor é habitualmente associada ao cancro e ao seu tratamento, sendo os opioides frequentemente conjugados com a terapia antineoplásica. Esta conjugação acarreta possíveis interações medicamentosas que podem originar a falha do tratamento e ocorrência de reações adversas. O citocromo P450 é responsável pela metabolização da maioria dos medicamentos existentes no mercado, sendo de referir que os fármacos podem possuir atividade inibitória ou indutora sobre este complexo enzimático. Foram definidos como objetivos desta investigação, identificar, avaliar a gravidade e explicar as possíveis interações medicamentosas entre antineoplásicos orais e analgésicos opioides.