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- Multidose drug dispensing systems: a market studyPublication . Reis, Ana; Alves, Sandra; Jesus, Ângelo; Calvo, MaríaThis study investigates the willing to pay for a Multidose Drug Dispensing System(MDD)in pharmacies. The main aim of this study is to determine whether MDD is perceived as important in society (users or not) and their willing to pay for it. OMS concluded that increasing interventions to improve adherence to therapy may have more impact on the population’shealth than any improvement in medicaltreatment. Non-adherence is the main cause of avoidable costs for the National Healthcare System. This is an observational, cross-sectional descriptive study. Structured online questionnaire was conducted with 263 participants. It was applied a binary simple logistic regression to quantify how different the risk is between variables. From 261 respondents, 75.5%were female. The youngest respondent was 19 and the oldest 83 years old. About 40% had a BSc and about 45%of the respondents were patients. 84% refer no difficulty with medication intake and about 60% report no chronic disease. 59% refer that the service would not be useful to self, however only 6% consider the service not useful to a family member/acquaintance. About 76% of the respondents refer to be willing to pay for this service (67%would consider pay 10euros or less). Female population may present an estimated reduction of about 43% in the willing to pay compared to male population. When respondents were family members the willing to pay increase compared to when they were patients (126%). Finally, the population that recognize the importance of the service for a family member/acquaintance is expected to have anestimated increase in the willing to pay of about 190% when compared to the population that does not recognize that importance. In this study, generally, MDD service was perceived as important and men, more than women, havethe willing to pay for it.
- Characterization of genetic polymorphisms CYP2R1 rs2060793 and CYP2R1 rs12794714: potential biomarkers in endometriosis predispositionPublication . Varandas, Tatiana; Dias, Francisca; Sousa, Ana; Amorim, Manuela; Medeiros, RuiEndometriosis is an estrogen-dependent gynecologic disorder defined by the presence of endometrium outside the uterine cavity. Vitamin D is a steroid hormone known for its importance in various biological processes. Vitamin D may play a direct role in the changes that the endometrium undergoes during the menstrual cycle, as endometrial tissue also expresses enzymes involved in metabolism. The study of genetic polymorphisms in the genes of vitamin D metabolism, namely CYP2R1 rs2060793 and CYP2R1 rs12794714, may contribute to a better understanding to the development of endometriosis and become potential biomarkers of the disease. To evaluate the applicability of CYP2R1 rs2060793 and CYP2R1 rs12794714 polymorphisms as potential biomarkers of genetic predisposition to the development of endometriosis. A case-control study was carried out that included the analysis of 482 women recruited between 2011 and 2018 in two public hospitals in Rio de Janeiro, Brazil, as part of the "Cooperation Protocol" between UEZO and CI-IPOP. Genetic polymorphisms were analysed by allelic discrimination with the StepOnePlusTMreal-time PCR system using TaqManTMprobes. There was an association between women carrying the A allele of CYP2R1 rs12794714 polymorphism and early development of endometriosis in about 10 years (p=0.026). We also found that women carrying the A allele of the CYP2R1 rs12794714 polymorphism along with a BMI<30, caucasian women, and without ovarian disease developed endometriosis 10 years (p=0.031), 14 years (p=0.013), and 15 years (p=0.004) earlier, respectively, than women with the GG genotype. Although endometriosis appears at older age, there are factors that may be associated with the development of this pathology at an earlier age. The influence of genetic background, present from birth, seems to be of fundamental importance in the development of the disease at an early age. The allele A of CYP2R1 rs12794714 polymorphism could become a potential biomarker for disease prognosis.
- Pharmacological evaluation of plant extracts from the province of Cuanza Norte (Angola)Publication . Canga, Isabel; Vita, Pedro; Castro, María Ángeles; Pinho, CláudiaAngola has an important socio-cultural diversity and is one of the richest floristic regions of the world. Toperform an ethnopharmacological study in the Province of Cuanza Norte (Angola) and a pharmacological evaluation of African plant extracts. The field work was conducted from December 2018 to January 2019. Medicinal plants were listed along with their popular name, traditional use, part used, and method of preparation. In the experimental study, it was used aqueous and methanolic extracts from Adansonia digitata, Garcinia kola, and Gardenia ternifolia. Total phenolic content (TPC), total flavonoid content (TFC), and in vitroantioxidant assayswere performed. Also,cytotoxic activity against HepG2 cell line, and antibacterial activity against Escherichia coli and Staphylococcus aureus, were assessed. For the ethnopharmacological study, a total of 131 species of medicinal plants were cited by traditional healers. Mukumbi (Lannea welwitschii), Santa Maria (Chenopodium ambrosioides) and Ditumbata (Boerhavia difusa) were the most cited species, following by Embondeiro (Adansonia digitata). Leaves were the most frequently material used, and maceration the major form of plants preparation. The main categories of use were infectious and parasitic diseases; undefined pains and illness; diseases of the digestive system; and endocrine, nutritional, and metabolic diseases. For in vitro antioxidant assays, IC50 values ranged from 6.1±0.1 to 846.0±20.9 μg/mL. G. kolamethanolic extract showed the best TPC (131.4±5.7 mgGAE/g) and A. digitatashowed the best TFC (46.0±5.0 mgQE/g). Methanolic extracts showed higher TPC, TFC and antioxidant activity in general, compared to aqueous extracts. Methanolic extracts of G. kolaand G. ternifolia had the lowest MIC value of 0.625 mg/mL against Gram-positive S. aureus. Regarding cytotoxic activity, for HepG2, A. digitata and G. kolaextracts presented no cytotoxicity. These results provide preliminary knowledge about the analyzed medicinal plants and highlight therapeutic potentialities of African flora.
- Diagnóstico de infeções do trato urinário: comparação do desempenho do Sysmex UF-4000 com uroculturaPublication . Nunes, Ana Sofia; Lamas, Maria Céu; Ramos, Joana NeryAs infeções do trato urinário (ITU)são muito frequentes na comunidade, pelo que é importante maior rapidez no processo de diagnóstico clinico-laboratorial, de forma a prevenir possíveis resistências decorrentes da antibioterapia empírica. Nesta perspetiva, têm sido introduzidas metodologias automatizadas para análise de urinas antes de prosseguir para a cultura. Comparar os resultados obtidos pelo equipamento Sysmex UF-4000 com os resultados obtidos pelo método gold standard–Urocultura, relativamente à positividade e tipo de bactéria (Gramnegativo ou Gram positivo) presente nas amostras analisadas. Foram analisadas 545 urinas com suspeita de ITU, em meio de cultura Gelose ChromID®CPS®Elite(CPSE). As culturas foram consideradas positivas se crescimento >105UFC/mL. Para este estudo, mesmo que o resultado cultural não estabelecesse o diagnóstico de ITU, foi realizado o Gram a partir da cultura. As amostras foram consideradas positivas pelo equipamento SysmexUF-400, quando valores de densidade bacteriana ≥200μl e/ou leucócitos ≥45μl, e em cultura caso o crescimento bacteriano fosse ≥105 UFC/mL. Das 545 amostras, 437 (80,1%) foram concordantes entre as duas metodologias e 108 (19,8%) não o foram tendo-seobservado discrepâncias independentemente do nível de contagem de UFC e dos critérios pré-estabelecidos para o equipamento. Obteve-se uma sensibilidadede 94%, especificidadede 87%, VPNde 97%, VPPde73% e um Coeficiente de Kappa de Cohen, K= 0,786. O equipamento SysmexUF-4000 fornece resultados fiáveis relativamente à positividade e ao tipo de bactéria presente nas amostras estudadas o valor de K não evidencia existir discordâncias significativas. Contudo este tipo de metodologias ainda não pode substituir a uroculturas, mas permite a triagem rápida de amostras de urina negativas para ITU, contribuindo para a redução da carga de trabalho e custos associados, melhorar a qualidade por fornecer um resultado mais rápido, podendo evitar o uso inadequado de antibióticos.
- Infeções urinárias em felídeos e canídeos: etiologia e resistência aos antimicrobianosPublication . Pedro, Sónia; Carvalho, Hugo; Mota, SandraAs infeções urinarias são das patologias mais frequentes nos animais de companhia, são geralmente causadas por bactérias e o seu tratamento depende da utilização de antimicrobianos. Identificar a etiologia destas infeções em felídeos e canídeos, bem como estudar a sensibilidade aos antimicrobianos nos agentes etiológicos identificados. Foi realizado um estudo observacional descritivo transversal. Foram incluídos todos os resultados de uroculturas, antibiograma e sedimentos urinários de amostras que chegaram ao laboratório entre 01-10-2021 e 12-11-2021 provenientes de canídeos e felídeos de Portugal continental e ilhas. O estudo incluiu registos analíticos de 119 animais, 67 canídeos e 52 felídeos. Os agentes etiológicos mais frequentes nos canídeos foram Escherichia coli(44,78%), Proteus mirabilis(16,42%) e Staphylococcus pseudintermedius(10,45%). Nos felídeos foram a E.coli(55,77%), Enterococcus faecalis(11,54%)e Staphylococcus coagulase negativa (5,77%). Observou-se que mais de 90% dos isolados de E.coli, apresentaram resistência a Cefalexina (1ª geração) e mais de 50% à Cefalotina (1ª geração). Nos canídeos, verificou-se ainda resistência a 6 dos 19 antibióticos testados nos isolados de Staphylococcus aureuse nos felídeos observou-se resistência a 5 dos 15 antibióticos testados nos isolados de E.faecalis. Relativamente aos resultados do sedimento urinário foram observadas células epiteliais escamosas e de transição em todas as amostras e em 59,7% foram observados leucócitos. Relativamente aos métodos de colheita observa-se maior número de células (células epiteliais escamosas e de transição, eritrócitos e leucócitos) e cristais em amostras colhidas por cistocentese. A determinação precisa do agente etiológico e respetivo antibiograma é fundamental para a saúde do animal pois auxilia o médico veterinário na escolha do antibiótico mais adequado. Contudo, é também relevante a nível de Saúde Pública, pois previne o aparecimento de resistências bacterianas, que têm aumentado devido a utilização descontrolada de antibióticos, sendo atualmente um dos maiores desafios nesta área da medicina.
- Avaliação de diferentes atividades biológicas do extrato aquoso de um produto fitoterápico com moringa e aroma de limãoPublication . Bastos, Camila; Fonseca, Débora; Marques, Eduardo; Pinho, CláudiaA Moringa oleifera pertence à família Moringaceae. Acredita-se que a planta atue como antioxidante, antibacteriana, anti-inflamatória, anticancerígena, anti-hiperglicémica e neuroprotetora. Muitos são os estudos focados na pesquisa de atividades biológicas em extratos de M.oleifera, porém poucos são os realizados em produtos comerciais. Avaliar, in vitro, a atividade antioxidante, antibacteriana e citotóxica do extrato aquoso de um produto comercial contendo Moringa e Limão. Para a obtenção do extrato aquoso preparou-se uma infusão do produto (uma saqueta em 250 mlde água fervente, por 5 minutos), que foi filtrada e posteriormente liofilizada. Na avaliação da atividade antioxidante in vitro, recorreu-se ao ensaio do peróxidode hidrogénio (H2O2) e do 2,2-azinobis (3-etilbenzotiazolina-acidosulfónico) (ABTS), assim como à determinação do teor total de compostos fenólicos (TPC). Para avaliação da atividade antibacteriana, recorreu-se ao ensaio de difusão em discos (concentrações testadas: 0,5; 1; 5; e 10 mg/m) e à determinação da Concentração Mínima Inibitória (CMI), por microdiluição. Por fim, avaliou-se a citotoxicidade às 48h, pelo ensaio do 3-(4,5-dimetiltiazol-2-il) -2,5-brometo de difeniltetrazólio (MTT), em células A549 (linha celular epitelial de carcinoma do pulmão). Obteve-se um TPC de 45,7 ± 0,0 mg GAE/g extrato. Nos ensaios antioxidantes, os valores de IC50 foram de 3,1 μg/mle 200,8 ± 0,3 μg/ml para o ensaio de H2O2 e ABTS, respetivamente. Quanto à atividade antibacteriana, obteve-se um halo de inibição de 12 mm na concentração de 10 mg/ml, para a Escherichia colie Staphylococcus aureus, e um valor de CMI de 5 mg/mlpara a E.coli. Por fim, no ensaio de MTT, a % de viabilidade celular variou entre 56,6% e 61,2% às 48h. O extrato aquoso da mistura parece ter potencial antioxidante e antibacteriano que poderá estar associado aos compostos das plantas, porém mais estudos são necessários para confirmar os dados obtidos.
- Análise de variantes no gene STK11 e sua influência na resposta à imunoterapiaPublication . Bessa, Ana; Pina, Maria; Domingues, Patrícia; Dias, Margarida; Pinto, Carla; Cirnes, Luís; Silva, Regina A.A imunoterapia é uma das ferramentas terapêuticas de sucesso usadas no tratamento do cancro de pulmão, contudo alguns doentes apresentam progressão da doença ou morte. O gene Serine/ threonineKinase 11 (STK11) está descrito como tendo um papel na fisiologia do sistema imune(SI) e que alterações genéticas no mesmo podem influenciar negativamente a resposta dos pacientes à imunoterapia. Estudar alterações genéticas no gene STK11 em pacientes com cancro de pulmão sujeitos a imunoterapia e a sua possível associação com a resposta do doente à terapêutica. Após extraçãodo DNA de amostras de cancro pulmonar foi realizado um PCR multiplex para amplificação de 9 exões do geneSTK11, os quais foram sequenciados para pesquisa de alterações genéticas. Os pacientes foram divididos em dois grupos: “apresentaram boa resposta à terapia” e “apresentaram má resposta à terapia”, para efetuar curvas de sobrevivência que relacionam resposta à terapia com alterações em STK11. Foram detetadas e classificadas como patogénicas ou provavelmente patogénicas 13 alterações no gene STK11, não tendo sido identificada uma zona do gene ou exão com mais propensão a alterações. Pacientes com alterações no gene STK11 apresentaram pior sobrevida global e pior sobrevida livre de progressão de doença. Estes resultados sugerem que o gene STK11 deve ser estudado na sua totalidade aquando da decisão terapêutica e que deve ser incluído em painéis de Sequenciação de Nova Geração (NGS), uma vez que foram detetadas alterações neste gene com valor preditivo negativo na resposta à imunoterapia.
- Development of quercetin-loaded polymeric nanoparticles for topical applicationPublication . Carvalho, Daniel; Pinho, Cláudia; Moreira, Fernando; Oliveira, Ana IsabelQuercetin, a phenolic compound, has been attracting a growing interest from the scientific community due to its health benefits (i.e. antioxidant, anti-inflammatory, and cardiovascular protection), and may become useful in the prevention and/or treatment of several diseases. Nevertheless, its pharmaceutical industry application is limited, due to its physicochemical characteristics, such as bioavailability. However, there are several methodologies to overcome this constraint, such as nanotechnology, which as numerous advantages. The main aim of this study was the development of quercetin-loaded polymeric nanoparticles for skin application. Quercetin-loaded polycaprolactone (PCL) nanoparticles formulation were prepared using the nanoprecipitation method. Several proportion of PCL: quercetin (PCL:QUE) were studied. Nanoparticles were characterized regarding size, polydispersity index, zeta potential, association efficiency, and loading capacity In vitro assays were conducted to evaluate the effect of nanoparticles on HaCaT cells. To evaluate the effectof nanoparticles in cell viability MTT assay were used. For nanoparticles protective effect, a pre-incubation regimen was applied to determine cell viability. Among all tested PCL: QUE rations, an average size of 240 nm, with a polydispersity index around 0.240, and a zeta potential of about -24 mV were obtained. The association efficiency was about 40%. The proportion with a PCL:QUE ratio of 1:0.07 showed the best combination of characteristics and, consequently, the highest stability, and was selected for further testing. Cell proliferation determined by MTT assay after 24 hours reveal that at high concentrations, PCL: QUE nanoparticles were more effective in terms of cell proliferation than free quercetin (100 μg/mL; p < 0.001). Regarding pre-incubation regimen the same relation was observed (100 μg/mL; p < 0.001). The produced nanoparticles showed a good characteristic correlation and appeared to be stable. A protective effect and cell proliferation induction on HaCaT cells were observed when compared the highest concentrations tested for nanoparticles with the isolated compound.
- Suplementação oral com magnésio nas afeções do sistema nervoso central e o seu correto aconselhamento em farmácia: uma revisão narrativaPublication . Oliveira, André; Oliveira, Andreia; Cruz, AgostinhoO magnésio desempenha várias funções no organismo humano. A sua deficiência ([Mg 2+] < 0,75mg/dL), pode contribuir para o agravamentode várias patologias, entre elas as afeções do foro neurológico. A medicação utilizada para tratar estas doenças apresenta efeitos adversos e tem tendência a perder o seu efeito em situações de uso prolongado. Desta forma, torna-se essencial o conhecimento da suplementação com magnésio e dos seus benefícios nestas patologias, de forma a incrementar a qualidade de vida e segurança dos doentes. Verificar se a suplementação oral com magnésio influencia a evolução de patologias de foro neurológico e elaborar um algoritmo de apoio ao aconselhamento em farmácia. Revisão bibliográfica do tipo narrativo nas bases de dados Pubmed ® e RCAPP ® utilizando-se equações de pesquisa e critérios de inclusão e exclusão adequados a cada objetivo específico. Foram identificadas diversas variáveis endógenas e exógenas que condicionam a deficiência de magnésio. Os sais orgânicos de magnésio permitem uma maior biodisponibilidade e absorção do micronutriente no organismo, embora o óxido de magnésio (composto inorgânico) seja o mais estudado e vendido nos suplementos em Portugal. As afeções do foro neurológicoe psiquiátricoalvo de estudo com a suplementação de magnésio nos últimos 20 anos foram a depressão, ansiedade, insónia, enxaqueca e falta de memória e atenção. Foi desenvolvido um fluxograma de apoio ao aconselhamento em farmácia comunitária. O magnésio é um micronutriente essencial no organismo humano e evidencias científicas apontam para que o seu défice seja frequente entre a população em geral. A suplementação com magnésio parece diminuir a evolução da sintomatologia e promover a qualidade de vida em doentes com depressão, ansiedade, enxaqueca, insónia e dificuldades de memória e aprendizagem.
- Enhancing the detection of Dinophysis spp. using electrochemical genosensorsPublication . Pereira, Eduarda; Silva, Aurora; Morais, Stephanie L.; Costa-Rama, Estefanía; Moreira, Patrícia R.; Fraga-Corral, M.; Torrado, Ana M.; Rodríguez, Francisco; Barros, Piedade; Cruz, Agostinho; Delerue-Matos, Cristina; Prieto, M. A.; Simal-Gandara, J.; Silva, Nádia F. D.; Santos, Marlene; Barroso, M. FátimaHarmful algal blooms (HABs) pose a significant threat to the environment and public health. These blooms are defined by an accumulation of microscopic algae in water, and they can occur inlakes, rivers, estuaries, orcoastal areas. Factors like the unregulated runoff of agricultural and industrial wastes into the aquatic environment are believed to have transformed these ecosystems into favorable habitats for algae growth and proliferation. As a result, the frequency of these blooms is rising worldwide. Although these blooms are mostly harmless, certain species, namely dinoflagellates from the genus Dinophysis, produce toxins that pose a risk for human health. Therefore, the need for technological developments towards fast and precise detection of these toxin-producing microalgae is critical to prevent socio economical damages, as well as to assess the ecological status of marine ecosystems. In this work, an analytical approach based on an electrochemical genosensor device was developed to create a low-cost platform able to detect two dinoflagellate species from the genus Dinophysis: D.acuminataand D.acuta. The design of the DNA-based sensor involved three key steps: i) Sensing phase: consisted by a mixed self-assembled monolayer composed by a linear DNA capture probe and mercaptohexanol on to the disposable screen-printed gold electrodessurface; ii) Hybridization of complementary DNA sequence by using a sandwich format assay with enzymatic labels and iii) Electrochemical detection by chronoamperometry using an enzymatic scheme to amplify the electrochemical signal. The best analytical conditions used to study the relationship between electrochemical signal and DNA target concentration, to produce the best electrochemical genosensor device. Molecular biology tools, namely Polymerase Chain Reaction (PCR), will be used for further validation of the electrochemical genosensor to confirm its reliability. These advancements in analytical technologies contribute to the on going efforts in environmental management and public health protection by providing effective means for detectingand mitigating the risks associated with HABs. Further research and widespread implementation of these methods are required to ensure the safety and sustainability of aquatic ecosystems, safeguard public health, and facilitate proactive environmental management practices.
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