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Assessing functional activity of astrocytes by calcium imaging: how do astrocytes respond to the electrophysiological microenvironment

dc.contributor.advisorAroso, Miguel
dc.contributor.advisorAguiar, Paulo de Castro
dc.contributor.advisorFaria, Brígida Mónica
dc.contributor.authorSilva, Sara Cristina da Costa e
dc.date.accessioned2020-02-20T17:28:12Z
dc.date.available2020-09-30T00:30:19Z
dc.date.issued2019-11
dc.description.abstractApesar de não serem capazes de produzir potenciais de acção, é sabido que os astrócitos integram as sinapses, sendo capazes de detectar e responder a estímulos externos com dinâmicas de cálcio espaciotemporalmente complexas, podendo modelar a transmissão sináptica. O objectivo deste projecto é avaliar as dinâmincas de cálcio dos astrócitos através da modelação do seu microambiente electrofisiológico. Para tal, culturas de astrócitos foram estimuladas recorrendo a ThinMEAs©, monitorizando a actividade de cálcio. Os resultados obtidos demonstraram que os astrócitos respondem a estímulos de ±600mV ou ±800mV, gerando uma onda de cálcio que se propaga para células vizinhas. A amplitude, tempo de subida e velocidade de propagação da onda de cálcio está dependente do estímulo, sendo que um estímulo de maior amplitude resulta numa resposta de maior amplitude, demorando mais tempo a atingir o seu pico máximo mas atingindo distâncias mais longas. Apesar de preliminares, estes resultados indicam que os astrócitos são capazes de detectar e responder a mudanças eléctricas externas. Desta forma, os astrócitos são células electricamente excitáveis, possivelmente através do seguinte mecanismo: a estimulação leva à abertura dos canais de cálcio voltagem-dependentes de maneira dependente da voltagem, que irá sensibilizar o retículo endoplasmático resultando numa cascata de libertação de cálcio, gerando uma onda de cálcio que se irá propagar através de junções comunicantes ou gliotransmissão vesicular.pt_PT
dc.description.abstractAlthough not able to generate action potentials, it is known that astrocytes integrate synapses, being able to sense and respond to external stimuli with complex calcium dynamics, having the ability to shape synaptic transmission. The aim of this project is to assess astrocytic calcium dynamics upon the modulation of their eletrophysiological microenvironment. To accomplish this, astrocyte cultures were electrically stimulated using ThinMEAs© while monitoring their calcium activity. Obtained data showed that astocytes respond to a ±600mV or ±800mV stimulus by generating a calcium wave which propagates to neighboring cells. The amplitude, rise time and propagation velocity of the calcium wave is dependent on the stimulus, with a higher stimulation amplitude leading to a higher response amplitude, wich takes longer to reach its maximum peak but reach a larger distance. Although preliminary, these results indicate that astrocytes are able to sense and respond to changes of the electrical environment. In this way, astrocytes are electrically excitable cells, possibly due to the following mechanism: electrical stimulation causes voltage-gated calcium channels to open in a voltage-dependent manner, which will sensitize the endoplasmic reticulum leading to a cascade of calcium releases, generating a calcium wave, which will propagate through gap junctions or vesicular gliotransmission.pt_PT
dc.identifier.tid202445003pt_PT
dc.identifier.urihttp://hdl.handle.net/10400.22/15512
dc.language.isoengpt_PT
dc.relationPPBI-POCI-01-0145-FEDER-022122pt_PT
dc.relationMind The Gap: decoding and bridging somatosensory information in the spinal cord
dc.subjectAstrocitospt_PT
dc.subjectImagens de cálciopt_PT
dc.subjectEstimulação eletricapt_PT
dc.subjectAnálise de bioimagempt_PT
dc.subjectAstrocytes calcium wavespt_PT
dc.subjectCalcium imagingpt_PT
dc.subjectElectrical stimulationpt_PT
dc.subjectmicroelectrode arrayspt_PT
dc.subjectBioimage analysispt_PT
dc.titleAssessing functional activity of astrocytes by calcium imaging: how do astrocytes respond to the electrophysiological microenvironmentpt_PT
dc.typemaster thesis
dspace.entity.typePublication
oaire.awardTitleMind The Gap: decoding and bridging somatosensory information in the spinal cord
oaire.awardURIinfo:eu-repo/grantAgreement/FCT/9471 - RIDTI/PTDC%2FEMD-EMD%2F31540%2F2017/PT
oaire.fundingStream9471 - RIDTI
project.funder.identifierhttp://doi.org/10.13039/501100001871
project.funder.nameFundação para a Ciência e a Tecnologia
rcaap.embargofctContém dados temporariamente confidenciaispt_PT
rcaap.rightsopenAccesspt_PT
rcaap.typemasterThesispt_PT
relation.isProjectOfPublicationbd8216f3-74e5-4179-a655-bfa3301810e9
relation.isProjectOfPublication.latestForDiscoverybd8216f3-74e5-4179-a655-bfa3301810e9
thesis.degree.nameBioestatística e Bioinformática Aplicadas à Saúdept_PT

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