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Desenvolvimento de um anticorpo plástico para a deteção potenciométrica de um biomarcardor da doença de Alzheimer
| dc.contributor.advisor | Sales, Maria Goreti F. | |
| dc.contributor.advisor | Fernandes, Ruben | |
| dc.contributor.advisor | Moreira, Felismina | |
| dc.contributor.author | Ribeiro, Sónia Cláudia Silva | |
| dc.date.accessioned | 2018-03-23T12:35:30Z | |
| dc.date.available | 2018-03-23T12:35:30Z | |
| dc.date.issued | 2015-10 | |
| dc.description.abstract | A presente dissertação descreve o desenvolvimento de um dispositivo que se pretende que contribua para o diagnóstico da Doença de Alzheimer point-of-care, construído com base na preparação de um novo material biomimético e na sua incorporação em membranas poliméricas de poli(cloreto de vinilo), PVC, plastificado para subsequente deteção potenciométrica. Para este estudo foi considerado o biomarcador de interesse clínico convencional no contexto da Doença de Alzheimer (DA), o péptido -Amiloide 42 (Aβ42). O material biomimético foi preparado por ligação do péptido (Aβ-42) a uma superfície com nanotubos de carbono, seguindo-se de um pré-arranjo monomérico com monómeros de carga positiva. A mistura reacional utilizada para polimerização continha acrilamida 5,0×10-4 mol/L (monómero), N,N'-metilenobisacrilamida 1,0×10-4 mol/ L (reticulante) e persulfato de amónio (iniciador). O biomarcador foi removido da matriz polimérica por ação proteolítica da proteinase K. O material biomimético preparado foi aplicado na construção de sensores potenciométricos e testado relativamente à sua afinidade e seletividade de ligação ao péptido Aβ-42, por avaliação do desempenho analítico dos elétrodos resultantes. Para este efeito, o material biomimético foi disperso em membranas de PVC plastificado, que continham ou não um aditivo iónico lipofílico, e aplicado em suporte condutor sólido. A análise morfológica do biossensor foi avaliada por RAMAN e Espetroscopia de Infravermelho com transformada de Fourrier (FTIR). O desempenho analítico foi avaliado inicialmente em meio tampão e posteriormente em soro humano. As melhores características de resposta analítica foram obtidas com membranas preparadas com material impresso e com aditivo catiónico, brometo de tetraoctilamónio. O valor médio do limite de deteção (LD) foi 0,72µg/mL e o declive +59,04 mV/década. O biossensor foi aplicado com sucesso na análise preliminar de amostras de soro humano. | pt_PT |
| dc.description.abstract | This research presents the development of a new sensor device for the diagnosis of Alzheimer Diseases (AD) in point-of-care, made with new synthetic biomimetic materials that were incorporated in plastcized poly(vinyl chloride), PVC, membranes, for subsequente potentiometric detection. This concept was applied to target a conventional biomarker in Alzheimer diagnosis: β-Amyloid 42 (Aβ-42). The biomimetic material was designed by attaching the peptide Aβ-42 (0.01 µg/mL) to a surface of carbon nanotubes, and filling the vacante spaces by polymerizing acrylamide 5.0×10-4 mo1/L (monomer), N,N`-methylenebisacrylamide 1.0×10-4 mo1/L (cross-linker) and ammonium persulphate (initiator), under mild conditions. The template was removed by protheolitic action of na enzyme (Proteinase K). The stereochemical recognition of Aβ-42 of this material was confirmed by the non-rebinding ability displayed by non-imprinted (NIP) materials, obtained br imprinting without a template. The biomimetic material was employed in the construction of potentiometric sensors and tested with regard to its affinity and selectivity for binding Aβ-42, by checking the analytical performance of the obtained electrodes. For this purpose, the biomimetic material was dispersed in plasticized PVC membranes, including or not a lipophilic ionic additive, and applied on a solid conductive support made of grafite. The morphological analysis of materials was evaluated by RAMAN and Fourier Transform Infrared (FTIR) spectroscopies. Tha analytical behaviour of the devices was evaluated first in buffer and later in human sérum. The best analytical performance in buffer was obtained with membranes including biomimetic material and lipophilic cationic additive, tetra-n-octylammonium bromide. The average limit of detection was 0.72 µg/m Land the slope was +59.04 mV/decade. The biossensor was successfully applied to the preliminar analysis of human serum samples. | |
| dc.identifier.tid | 201888920 | pt_PT |
| dc.identifier.uri | http://hdl.handle.net/10400.22/11234 | |
| dc.language.iso | por | pt_PT |
| dc.subject | Doença de alzheimer | pt_PT |
| dc.subject | biossensores | pt_PT |
| dc.subject | biomarcador | pt_PT |
| dc.subject | β-amiloide | pt_PT |
| dc.title | Desenvolvimento de um anticorpo plástico para a deteção potenciométrica de um biomarcardor da doença de Alzheimer | pt_PT |
| dc.type | master thesis | |
| dspace.entity.type | Publication | |
| rcaap.rights | openAccess | pt_PT |
| rcaap.type | masterThesis | pt_PT |
| thesis.degree.name | Bioquímica em Saúde | pt_PT |