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- Epidemiologia do cancro do colo uterino e o impacto da vacinação contra o HPV: a realidade portuguesa no contexto europeuPublication . Marques, Ana; Fernandes, Sílvia; Silva, Regina A.A atual disponibilidade de vacinas e testes de rastreio molecular para o HPV aumentaram a possibilidade de eliminar globalmente o cancro cervical e outras patologias relacionadas com o vírus. No entanto, têm surgido vários obstáculos à implementação dos programas de vacinação contra o HPV a nível mundial. Este estudo tem como objetivos compilar e analisar estatisticamente a informação acerca da vacinação contra o HPV e políticas de rastreio de cancro cervical, em Portugal e em outros países europeus; e avaliar o impacto na incidência e mortalidade de cancro cervical, ao longo dos anos.
- Quantificação da carga viral de HPV de alto risco e associação com o desenvolvimento de lesões cervicaisPublication . Oliveira, Telma; Fernandes, Sílvia; Alves, Daniela; Frutuoso, José Amaro; Silva, Regina A.O desenvolvimento de métodos quantitativos para estimar a carga viral tem vindo a melhorar a capacidade de controlar a progressão de doenças e avaliar a eficácia dos tratamentos. Com o presente estudo pretende-se estimar a carga viral em mulheres infetadas com o Vírus do Papiloma Humano (HPV) de alto risco, e avaliar a sua associação com os dados clinicopatológicos para determinação da sua utilidade como fator de prognóstico. Foram consideradas no estudo 365 mulheres seguidas em consulta de ginecologia da Unidade Local de Saúde de Matosinhos, com resultado positivo para infeção por HPV de alto risco, determinada por PCR semi-quantitativo. A carga viral foi estimada usando retas de calibração construídas com base em amostras padrão.
- Avaliação do método histoquímico GASMoC para demonstração de micobactériasPublication . Cunha, Rute; Silva, Susana; Silva, Regina A.O método histoquímico Ziehl-Neelsen (ZN) é o método eleito em Anatomia Patológica e Microbiologia para a demonstração de micobactérias em tecidos e amostras citológicas. É usada uma solução corante de carbol-fuscina que contém fenol, um composto muito corrosivo e tóxico, que provoca efeitos adversos quando em exposição crónica. Recentemente, foi desenvolvido um método alternativo e isento de fenol (GASMoC), testado apenas em amostras de tecido infetado por duas espécies de Mycobacterium.
- Cytochemical characterization of ascitic fluid from a patient with ovarian cancer- a case reportPublication . Silva, Susana; Silva, Regina A.; Ferreira, Verónica; Lobo, Cláudia; Monteiro, Paula; Abreu, Miguel Henriques; Bartosch, Carla; Ricardo, SaraEpithelial ovarian cancer is the most lethal gynecological malignancy and peritoneal metastases are the leading cause of morbidity and mortality. Malignant cells shed from primary tumor and float in ascitic fluid, as single cells or multicellular spheroids, and later implant on the peritoneal lining.
- Molecular techniques for the neonatal screening of spinal muscular atrophyPublication . Oliveira, Renata; Granja, Sara; Silva, Regina A.; Rocha, HugoSpinal muscular atrophy (SMA) is neurodegenerative disease mainly caused by the homozygous deletion of the functional telomeric survival motor neuron 1 gene (SMN1) exon 7. This absence causes a lack of the ubiquitous SMN protein which selectively destroys alfa motor neurons. Due to the disease severity, it is the leading genetic cause of infant death. The copy number of the centromeric SMN2 gene has an inverse correlation with the phenotype. SMA is currently classified in 5 types – Type 0 (lethal in womb or in the first weeks of life), Type I (approximately 50% of cases), Type 2 (children can sit alone), Type 3 (children can walk independently) and Type 4 (mildest form that appears in adults). Diagnosis is only made when symptoms arise and, by then, motor neurons are already irreversibly lost. Three therapies are now available, but they are most effective in the asymptomatic phase. To achieve this objective, the strategy is to include SMA in the panel of diseases screened in the Neonatal Screening (NS) Programs. In this sense, we describe the implementation of an in-house assay, that detects the absence of exon 7 of the SMN1 gene through the real-time polymerase chain reaction technique, adapted to NS. Normal controls and pathological samples collected from Guthrie cards were used. Our results show 100% concordance with the known genotypes (100% sensitivity and specificity). This method is a reliable, simple and affordable way to screen for this lethal disease.
- Salt replacement by Salicornia ramosissima to reduce biogenic amines formation in fishPublication . Ramos, Ana Gabriela; Viegas, Olga; Pinto, Edgar; Ferreira, Isabel M.P.L.V.O.Salicornia ramosissima is frequently used as a salt replacer due to its high salt content. Its richness in phenolics, organic acids, minerals, and fiber make it an interesting natural preservative. The impact on biogenic amines formation from replace salt by seasoning fish products with salicornia has not been explored. Biogenic amines (BA), including histamine (HIM), cadaverine (CAD), putrescine (PUT), 2-phenylethylamine (2-FEN), tryptamine (TRI) and tyramine (TIR) are a group of undesirable compounds that can arise in foods, such as fish during its shelflife. Their consumption by susceptible individuals can lead to poisoning, especially histamine [1]. Therefore, reduction of their formation during shelf-life of fish products is of major relevance. The objective of this work was to explore the possibility of using Salicornia ramosissima in the formulation of fish hamburgers (salmon and hake) to replace salt seasoning (1%) and protect against biogenic amines formation. Biogenic amines were analysed by reverse phase HPLC with fluorescence detector, after acid extraction and derivatization with dansyl chloride. On the day of fish acquisition (day 0), salmon presented 5.0, 1.7 and 1.2 mg/kg of HIM, PUT and CAD, respectively and hake presented 8.3, 0.6 and 0.3 mg/kg of HIM, PUT and CAD, respectively. In both fishes tryptamine was detected but not quantified (< 0.487 mg/kg) and 2-FEN and TIR were not detected. On day 2, a considerable increase of all BA was observed in salmon burgers (∑BA control salmon = 257 mg/kg). The salicornia seasoning led to a mild inhibition of BA formation in those hamburgers, without statistical significance (∑BA 226 mg/kg). On days 5 and 8, a considerable increase in BA continued to be observed. However in hake, on day 2, the increase in BA was negligible (∑BA control: 12.6 mg/kg), and no significant effects could be observed by the addition of salicornia (7.9 mg/kg). However, on day 5 (∑BA control = 56.0 mg/kg), a significant reduction (p < 0.05) of the total BA content was observed in the hamburgers seasoned with salicornia (∑BA = 42.6 mg/kg), especially by inhibition of cadaverine formation (38.2 mg/kg vs 18.0 mg/kg). By day 8, the ∑BA of the control burgers increased to 117 mg/kg, whereas in burgers with salicornia BA content was similar to that observed on day 5 (42.9 mg/kg). Salicornia salt was not able to significantly prevent BA formation in salmon samples. Contrary to hake burgers, in which a strong inhibition of total BA was observed on days 5 (~ 50%) and 8 (~ 80%), this effect being greater than that observed by the addition of salt (~ 20% on day 8), and especially observed in cadaverine.
- DGCR8 microprocessor subunit mutation and expression deregulation in thyroid lesionsPublication . Rodrigues, Lia; Canberk, Sule; Macedo, Sofia; Soares, Paula; Vinagre, JoãoDeregulation of microRNA (miRNA) processing is a driver event in several tumours including thyroid cancer. DiGeorge Critical Region 8 (DGCR8) gene holds a critical role in miRNA biogenesis, as a microprocessor complex component, and in the development of the thyroid. Previous studies identified a DGCR8 mutation – the variant c.1552G>A p.(E518K) – in cases of thyroid cancer and proposed to cause a familial syndrome characterized by multinodular goitre (MNG) and schwannomatosis. The goal of this study was to characterize the variant p.(E518K) of DGCR8 in thyroid lesions and evaluate its expression.
- Infeção por SARS-CoV-2 e marcadores de autoimunidadePublication . Reis, Cláudio; Marinho, Ana Sofia; Ramos, Angélica; Wolfango, Iolanda; Guimarães, João Tiago; Ribeiro, Luís; Cardoso, Maria JoãoMeses após o aparecimento da COVID-19 começou-se a investigar uma possível ligação da infeção por SARS-CoV-2 e o desenvolvimento de autoimunidade, uma vez que, tem vindo a ser descrita a associação da infeção por alguns vírus com o desenvolvimento de doenças autoimunes (DAI). Neste estudo, pretendemos avaliar a relação entre a infeção por SARS-CoV-2 e o desenvolvimento de autoimunidade, através da produção de autoanticorpos.
- Teste fragilidade osmótica por citometria de fluxo, o teste de referência do futuro: Estudo comparativo entre três soluções salinasPublication . Santos, Marlene; Schelfhout, Jasmijn; Santos, Ana Helena; Fernandes, Sílvia; Ventura, Vânia; Oliveira, Lurdes; Gonçalves, Marta; Moreira, Raquel; Fonseca, Sónia; Pereira, Filipa Martins; Santos, Filipa; Lau, Catarina; Teixeira, Maria AnjosA avaliação da fragilidade osmótica por citometria de fluxo tem sido introduzida na prática clínica nos últimos anos, utilizando um método descrito por Won et al, em 2009. Esta metodologia afere, em tempo real, o quociente entre os eventos registados antes e após exposição dos eritrócitos a uma solução indutora de hemólise, num determinado período de tempo. O método clássico de determinação da fragilidade osmótica avalia indiretamente, por leitura da absorvância, a proporção de eritrócitos lisados, quando submetidos a stress osmótico em soluções hipotónicas seriadas de cloreto de sódio (NaCl).
- Novos marcadores imunofenotípicos de prognóstico no mieloma múltiploPublication . Reis, Cláudio; Magalhães, Conceição; Marques, Cristina; Guimarães, João Tiago; Pereira, Margarida; Silva, SóniaO mieloma múltiplo (MM) é uma discrasia plasmocitária, caracterizada pela proliferação de um clone de plasmócitos neoplásicos. A Euroflow definiu um painel de anticorpos direcionado para o diagnóstico e prognóstico do MM, por citometria de fluxo (CF). Vários parâmetros clínicos-laboratoriais são utilizados na determinação do prognóstico desta doença, tendo sido recentemente implementados novos marcadores imunofenotípicos com valor prognóstico (CD27, CD28, CD81 e CD117).