Percorrer por autor "Schneider, Maria Eduarda"
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- Desenvolvimento de uma metodologia colorimétrica para determinação de compostos fenólicos em bebidas comerciais.Publication . Schneider, Maria Eduarda; Duarte, Abel José AssunçãoA produção de radicais livres é um processo comum e necessário dos organismos vivos, e como consequência disso, os mesmos podem reagir e causar danos oxidativos que são responsáveis pelo envelhecimento e doenças degenerativas. De forma a combater estes efeitos o organismo consegue desenvolver defesas antioxidantes, porém algumas atitudes e hábitos podem ajudar nestes mecanismos de defesa. Sendo assim, uma dieta rica em compostos fenólicos pode ser de suma importância devido às suas propriedades antioxidantes. As frutas, vegetais e seus derivados são as principais fontes destes compostos. Além disso, os polifenóis também influenciam a qualidade dos produtos, pois atuam no processo de oxidação, tendo um papel importante na cor e evolução da sensação gustativa (adstringência). Sendo assim a determinação destes compostos é uma tarefa importante a fim de avaliar a potencial aplicação destes produtos como fonte de antioxidantes. O presente trabalho descreve a monitorização de polifenóis em bebidas comercias disponíveis no mercado. A presença dos polifenóis traduz o potencial de inibição de processos de oxidação característico dessas bebidas. Esta medida foi efetuada por deteção ótica e permite estimar quantitativamente os teores de compostos fenólicos totais medidos pela atividade enzimática da Horseradish peroxidase (HRP) e uma enzima artificial de nanocubos de Azul de Prússia (NcAP). Foi realizado um estudo para avaliar a linearidade e os limites de deteção para ambos os ensaios. Os resultados foram calculados com base em antioxidantes de referência. Neste trabalho utilizaram-se o ácido gálico (AG) e ácido tânico (AT). Em termos gerais, os NcAP mostraram ser eficientes na atividade mimética da peroxidase na reação típica de H2O2 e 3,3',5,5'-tetrametilbenzidina (TMB). O mecanismo catalítico foi confirmado por análise colorimétrica. Para o desenvolvimento da metodologia foram realizadas otimizações de temperatura, concentração, pH e tempo de reação. Com a enzima natural verificou-se que a melhor condição de reação foi 0,4 mM de TMB, 4,0 mM de H2O2, 0,03 µg/mL de HRP, pH 4, temperatura ambiente e um tempo de reação de 2 minutos. Os compostos fenólicos foram detetados até níveis µM, com um LOD = 6,62 µM para ácido gálico (AG) e 0,41 µM para ácido tânico (AT). Os valores de R2 de 0,9856 e 0,9912 para deteção de AG e AT, respetivamente, sugerem uma boa linearidade. A mesma metodologia foi reproduzida com a enzima artificial, neste caso, NcAP. Foram otimizados parâmetros como o pH, temperatura e tempo de reação para um valor de concentração de NcAP de 0,01 µg/mL. Os compostos fenólicos foram também detetados em níveis µM com um LOD = 5,63 µM para AG e 1,51 µM para AT. Os valores de R2 de 0,986 e 0,977 para deteção de AG e AT, respetivamente, sugerem uma boa linearidade. Por fim, ambas as metodologias foram aplicadas na avaliação de compostos fenólicos em bebidas comerciais. Os resultados através da metodologia com HRP sugerem resultados próximos para os diferentes antioxidantes analisados, por outro lado, os resultados com NcAP apresentam algumas discrepâncias. No entanto, apesar dos resultados obtidos serem promissores, podemos concluir que a etapa de análise de amostras reais com a metodologia NcAP ainda carece de otimizações para seguimento em trabalhos futuros.